組織の線維化を促進する転写共役因子の機能解析

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19J20083
• 研究機関: 九州大学
• 研究代表者: 堀井 雄真 九州大学, 薬学府, 特別研究員(DC1)
• 研究期間 (年度): 2019-04-25 – 2022-03-31
• キーワード: 線維化 / 筋線維芽細胞

研究実績の概要

線維化とは、組織にコラーゲンなどの細胞外マトリックスが蓄積し、硬化することで臓器の機能障害を引き起こす疾患である。そのため、線維化は、先進国の死亡原因の約45%に関与することが報告されているが、有効な治療薬は未だほとんど存在しない。線維化は、筋線維芽細胞という細胞群がコラーゲンなどの 細胞外マトリックスタンパク質を産生することにより、実行される。我々は、心臓の線維化時に発現が増加し、線維化関連因子の産生を促進する転写関連因子を同定し、その機能解明を目的に研究を行っている。
そこで、本年度はこの転写関連因子がどのタンパク質と相互作用し線維化関連因子の発現を制御しているかについて解明するために質量分析解析を行った。その結果、いくつかの候補因子を同定することができた。さらに、その因子の発現をsiRNAを用いてノックダウンさせ、線維化関連因子の発現を測定した結果、線維化関連因子の発現が抑制された。今後は、どのようなメカニズムで転写関連因子と共に線維化関連因子の発現を制御しているのかについて検討を行う予定である。
また、この目的の転写関連因子が生体内においても組織の線維化に関与しているかについて明らかにするために、現在筋線維芽細胞特異的にこの転写関連因子を欠損させたマウスの作成を行なっている。現在は、当初の予定通りに、この転写関連因子のfloxマウスの作成を行うことができた。今後は、筋線維芽細胞特異的にCreを発現するCreマウスと掛け合わせることで、この転写関連因子の筋線維芽細胞特異的な欠損マウスを作成する予定である。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

当初の予定通り、目的の転写関連因子に結合するタンパク質の同定を質量分析を行った。その結果、結合するタンパク質の同定を行うことができた。
また、筋線維芽細胞特異的な目的の転写関連因子欠損マウスの作成も順調に作成が進んでいる。現在は、目的の転写関連因子のfloxマウスを作成することができた。

今後の研究の推進方策

今後は、質量分析で同定されたタンパク質がどのようなメカニズムで目的の転写関連因子と共に、線維化関連因子の発現を制御しているか検討する。同時に、目的の転写関連因子の核内移行を制御する分子の探索を行う。
また、筋線維芽細胞特異的な目的の転写関連因子欠損マウスの作成も引き続き行う。次回は、筋線維芽細胞特異的にCreを発現するマウスと掛け合わせることで、筋線維芽細胞特異的な目的の転写関連因子欠損マウスの作成を行う予定である。