| 研究実績の概要 |
昨年度構築したラベルフリー多光子イメージングフローサイトメーターを実用に耐えうるものとするよう、acoustic focusing用に使用するピエゾ素子の種類と過電圧を最適化することで、流路中を流れる細胞のフォーカシングの精度を長時間(>1 hour)安定させることに成功した。これにより多数の(> 10,000 cells)細胞の連続多光子イメージングが可能となった。
改良した本開発装置のデモンストレーションとして、Chromochloris zofingiensis (NIES-2175) のイメージング、解析を行った。C. zofingiensisは高効率なスターチ合成を行う藻類の一種として近年注目を浴びており、スターチの合成効率をより高めるための培養条件検討等の研究が行われている。Colorimetry（比色分析）等の従来のスターチ定量法では、一細胞単位でスターチの定量、細胞内のスターチ分布の情報が得られず、様々な培養条件化におけるそれぞれの細胞のHeterogeneity（異質性）の情報が損なわれてしまっている。この問題を解決すべく、本開発装置を用いて10培養条件でそれぞれ2,000細胞のイメージングを行った。また、装置で得られたraw dataから画像を再構成し、また得られた多数の画像を解析するプログラムを構築、使用し、培養条件の変化に対するC. zofingiensis細胞の応答を統計的に解析した。本開発手法のデモンストレーションとして藻類のイメージングを行ったが、がん細胞スフェロイドのコラーゲン分布のイメージングにも応用ができ、本開発装置を用いたドラッグスクリーニングやがん検出への応用が期待される。
|
