研究課題
令和2年度の研究において、酪農家畜の初乳に発見された糖ヌクレオチドであるがヒト小腸上皮HIEC細胞に対する増殖を促進しうるか探索したが、効果は発見できなかった。令和3年度は、糖ヌクレオチドが細胞機能に対する刺激効果を持ちうるか探索する目的で、上皮組織の表面を覆うムチン層の発現に対する影響を調査した。in vitroの実験系として、小腸を模した系としてCaco2:HT29-MTX細胞=9:1の共培養系を使用した。それを播種して20日間培養した後、牛初乳に含まれる糖ヌクレオチドを添加し、6, 12また24時間培養を行った。サンプルは糖ヌクレオチドを添加しないコントロール群、生理的濃度として終濃度200μg/mLのUDP-GalまたUDP-Glcを含む３群とした。培養後、細胞からトータルRNAを回収し、cDNAに逆転写した後、MUC２またMUC3遺伝子発現への影響をリアルタイムPCRで相対化した。スタンダードカーブ法で相対化し、ハウスキーピング遺伝子のβ-アクチン、GAPDHで正規化を行い、スチューデントのt検定で有意差を調べた。6時間の培養系ではUDP-Gal添加群、UDP-Glc添加群ともコントロール群と比べてMUC2遺伝子の発現量の有意な上昇が発見された。12時間培養では糖ヌクレオチド添加群は、コントロール群と比べてMUC2発現量は有意に低下したが、24時間培養ではUDP-Glc添加群で発現上昇の傾向があった。一方、MUC3発現に対しては6時間、12時間培養で糖ヌクレオチド添加群で低下傾向があったが、24時間培養ではUDP-Gal添加群で上昇する傾向が認められた。このような結果から、初乳に含まれる糖ヌクレオチドには乳子の小腸組織においてムチン発現量に対する影響のあることが示唆された。一方、このような傾向には再現性があるか、さらに研究実施例を増やすことが必要である。
すべて 2022
すべて 雑誌論文 (3件) (うち国際共著 3件、 査読あり 2件)
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