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X染色体不活化に関わるXIST遺伝子の発現調節機構に着目し，体細胞クローン牛および非クローン牛の各種臓器（心臓，肺，肝臓，脾臓，腎臓，空腸，骨格筋）からゲノムDNAを抽出し，バイサルファイトシーケンス法を用いてXIST遺伝子プロモーター領域のDNAメチル化状態を解析した。その結果，メスの個体ではメチル化状態は臓器・個体によりかなりの変動があったものの，平均するとクローン牛と非クローン牛間で優位な差は検出できなかった。また，オスの個体は数が少なかったものの，すべての個体・すべての臓器で非常に高度なメチル化状態を維持している。X染色体不活化はメスに特異的な現象であり，XIST遺伝子はX染色体不活化の初期段階に必須なnon-coding RNAであることが知られていることから，オスではXIST遺伝子がすべての臓器で高度にメチル化されており，XISTの発現が抑制されていることが確認できた。一方，メスでは半数のX染色体がランダムに不活化されているが，今回用いたサンプルからはRNAは回収していないため，メチル化と発現調節については，以下の通り培養細胞を用いた研究を行った。
種々のウシ培養細胞に対してDNAメチル化阻害剤である5-aza-2-deoxycytidineを添加し，XIST遺伝子の発現状態およびDNAメチル化状態を解析したところ，一部の細胞株（オス）において，XIST遺伝子の再不活化およびDNAメチル化の低下が見られたことから，ウシにおいてもDNAメチル化がXIST遺伝子の不活化に必須の役割をしていることが示唆された。
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