| 研究課題/領域番号 |
19K06425
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| 研究機関 | 酪農学園大学 |
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研究代表者 |
樋口 豪紀 酪農学園大学, 獣医学群, 教授 (00305905)
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| 研究分担者 |
藤木 純平 酪農学園大学, 獣医学群, 講師 (30805114) [辞退]
岩野 英知 酪農学園大学, 獣医学群, 教授 (60382488)
権平 智 酪農学園大学, 獣医学群, 講師 (80795089)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | Mycoplasma bovis / 滑膜細胞 / ウシ / 細胞内侵入性 |
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| 研究実績の概要 |
これまでの研究において、M. bovis はマイコプラズマ属菌の中で病原性が最も高く、子牛に重度の関節炎を引き起こすこと、また、それは白血球系細胞を介した、サイトカインやMMP分子の誘導によるものであることを示した。また、投与試験では関節の細胞数増加、肉芽組織の形成および関節軟 骨の破壊など、重篤な病態が観察された。これは M. bovis の感 染が関節内で強い炎症反応を誘導しているものと考えられるが、その 詳細なメカニズムについては未だ明らかにされていない。本研究では滑膜細胞への侵入機構について詳細を解明した。
①M. bovis は感染 15 分で滑膜細胞に付着または侵入し、その数は感染時間の経過に伴い有意な増加を示した。しかし、死菌処理によってこれらの応答は消失した。以上の結果から、M. bovis （生菌）は滑膜細胞に対して付着または侵入性を有るすことが明らかになった。
②共焦点レーザー顕微鏡および電子顕微鏡下にて滑膜細胞に内在する M. bovis が確認された。さらに、ゲンタマイシンで処理した滑膜細胞か ら M. bovis が検出された。このことから、M. bovisは滑膜細胞に対して侵入性を示すことが形態学的に明らかとなった。
③蛍光顕微鏡下でクラスリン依存性エンドサイトーシスの主要な因子 である Clathrin heavy chain と M. bovis の共局在が観察された。また、クラスリン依存性エンドサイトーシスの阻害薬で処理された滑膜細胞 および Clathrin heavy chain を siRNA でノックダウンした細胞に内在す る M. bovis の数はコントロールと比較して有意に減少した。このこと からクラスリン依存性エンドサイトーシスは M. bovis の細胞侵入に関 わる主要な経路の一つであることが明らかとなった。
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