単一細胞解析による覚醒制御機構の解明

2019 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 19K06891
• 研究機関: 関西医科大学
• 研究代表者: 田中 進 関西医科大学, 医学部, 准教授 (30399472)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2022-03-31
• キーワード: 単一細胞解析 / オレキシン / 睡眠 / 覚醒

研究実績の概要

本年度、感染事故が発生し全ての遺伝子改変マウスを殺処分としたため、目的となるORX-GFPマウスからのオレキシンニューロンの単離は行えていない。
代わりに細胞ピッキング装置にて野生型の視床下部外側野から未染色の細胞を単離し、細胞数と抽出されるRNA量を検討した。思うほどのRNA量は取れておらず、スライス作成条件、スライス作成時間の短縮、ならびにピッキング時間の短縮を行っている。

現在までの達成度 (区分)

4: 遅れている

理由

本年度、感染事故が発生し全ての遺伝子改変マウスを殺処分としたため、目的となるORX-GFPマウスからのオレキシンニューロンの単離は行えていない。そのため、予備的な実験に留まり、本研究のコアとなる実験には着手出来ていない。

今後の研究の推進方策

hORX-GFPマウスを起こし直し、オレキシンニューロンのピッキング条件を検討する。
また、予備的に得られたRNAにてナノポアシークエンス解析をおこない、必要RNA量や純度を検討する。

次年度使用額が生じた理由

（理由）感染事故によるマウス殺処分のため研究遂行が不可能であった。また、コロナウィルスによる学会関連の中止が相次ぎ、旅費等の支出が無かった。
（使用計画）細胞ピッキングのための蛍光顕微鏡購入に充てる。

研究成果

• [雑誌論文] GATA4/6 regulate DHH transcription in rat adrenocortical autografts (2020)
  • 著者名/発表者名: Yoshida T, Takizawa N, Matsuda T, Yamada H, Kitada M, Tanaka S
  • 雑誌名: Sci Rep 巻: 10 ページ: 446
  • DOI: 10.1038/s41598-019-57351-5
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] 特集「睡眠時無呼吸症候群：基礎から臨床」 全身疾患としての睡眠障害：機序と臨床 6.免疫異常 (2020)
  • 著者名/発表者名: 田中進
  • 雑誌名: THE LUNG perspectives 巻: 28 ページ: 49-52
• [雑誌論文] Involvement of PLAGL1/ZAC1 in hypocretin/orexin transcription (2019)
  • 著者名/発表者名: Tanaka S, Honda Y, Takaku S, Koike T, Oe S, Hirahara Y, Yoshida T, Takizawa N, Takamori Y, Kurokawa K, Kodama T, Yamada H
  • 雑誌名: Int J Mol Med 巻: 43 ページ: 2164-2176
  • DOI: 10.3892/ijmm.2019.4143
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Morphological characteristics of p75 neurotrophin receptor-positive cells define a new type of glial cell in the rat dorsal root ganglia. (2019)
  • 著者名/発表者名: Koike T, Tanaka S, Hirahara Y, Oe S, Kurokawa K, Maeda M, Suga M, Kataoka Y, Yamada H
  • 雑誌名: J Comp Neurol 巻: 527 ページ: 2047-2060
  • DOI: 10.1002/cne.24667
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] グリオーママルチレイヤーモデルに基づいた腫瘍関連マクロファージ/ミクログリアのサブタイプ解析 (2020)
  • 著者名/発表者名: 中野洋輔, 田中進, 加瀬政彦, 平原幸恵, 大江総一, 小池太郎, 北田容章
  • 学会等名: 第125回日本解剖学会総会・全国学術集会
• [学会発表] 質量顕微鏡を使った腎臓における硫酸化糖脂質分子種の同定と可視化 (2020)
  • 著者名/発表者名: 中島啓子, 平原幸恵, 蒲生恵三, 大江知里, 吉田崇, 小池太郎, 田中進, 本家孝一, 北田容章
  • 学会等名: 第125回日本解剖学会総会・全国学術集会
• [学会発表] 副腎皮質におけるSry発現細胞の同定 (2020)
  • 著者名/発表者名: 田中進, 吉田崇, 滝澤奈恵, 大江総一, 小池太郎, 松田公志, 山田久夫, 北田容章
  • 学会等名: 第125回日本解剖学会総会・全国学術集会
• [学会発表] ラット副腎自家移植片リモデリングへのDesert Hedgehogの関与 (2020)
  • 著者名/発表者名: 滝澤奈恵, 田中進, 大江総一, 小池太郎, 吉田崇, 平原幸恵, 松田公志, 山田久夫
  • 学会等名: 第107回日本泌尿器科学会総会