| 研究課題/領域番号 |
19K07141
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| 研究機関 | 東京薬科大学 |
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研究代表者 |
一柳 幸生 東京薬科大学, 薬学部, 教授 (80218726)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | ブルサトール / RA-VII / シノコクリン / フッ化アナログ / 細胞毒性 |
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| 研究実績の概要 |
本年度は、カッシノイド化合物のブルサトール類のフッ化アナログを合成するとともに、天然RA系化合物のフッ素化によるフッ化アナログの合成を検討した。また、シノコクリン（抗腫瘍性モルヒナンアルカロイド）のフッ化アナログ合成のための原料供給を行った。内容を以下に要約する。
１．アタンシ(Brucea javanica の果実)から供給したブルサトール、および類縁カッシノイドの化学変換により得られたデヒドロブルサトールとブルセオシンに対して求電子的フッ素化剤Selectfluorを反応させたところ、それぞれA環部にフッ素１原子が導入されたアナログが得られた。導入されたフッ素原子の位置および立体配置は、二次元NMRスペクトルの解析により決定した。
2．アミノ酸側鎖にヒドロキシ基を有する RA-III、RA-IVおよび RA-VIII についてPyfluor、石川試薬、DASTを用いて求核置換反応によるフッ素原子の導入を検討した。これらのうちRA-IVだけがフッ化物を与えたが化学的に不安定なため、細胞毒性を評価することはできなかった。また、Selectfluor、1,1′-ジフルオロ-2,2′-ビピリジニウムビス(テトラフルオロボラート)を用いてRA-V、RA-IVのケトン体のフッ素化を試みたが、いずれもフッ化体は得られなかった。
3．木防已（アオツヅラフジCocculus trilobusの根および茎）のメタノール抽出エキスよりシノコクリンを分離精製し、その第二級アミノ基および４位のフェノール性ヒドロキシ基に保護基を導入してフッ素化アナログ合成の原料化合物を調製した。本化合物の７位ヒドロキシ基をケトン基に酸化すると６位ヒドロキシ基をフッ素原子で置換できることを見出した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
カッシノイドのフッ化アナログについては、ブルサトール、デヒドロブルサトール、ブルセオシンのA環部にフッ素原子を導入したアナログを合成することができた。また、フッ化アナログ合成に用いる適切な保護基を有するシノコクリン誘導体を調製することができた。
一方、RA系ペプチドについては天然RA類を用いて新たなフッ化アナログの合成を検討したが、化学的に安定な形でフッ化物を得ることはできなかった。
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| 今後の研究の推進方策 |
ブルサトール系カッシノイドについては、今年度合成した３種のフッ化アナログのヒト癌細胞を用いた細胞毒性試験を実施する。先ずHL-60白血病細胞株により評価し、ブルサトール、ブルセオシン、デヒドロブルサトールと活性を比較する。合成したフッ化アナログがHL-60細胞株に対してこれらの原料化合物と同等以上の細胞毒活性を示した場合は、さらに数種の固形腫瘍の細胞株を用いて評価する。合成フッ化アナログがヒト腫瘍細胞株に対して天然ブルサトール類より高い細胞毒活性を示した場合は、動物実験を実施可能な量の原体を供給できるように収率の改善や反応工程の改良を試みる。
RA系ペプチドについては、合成したRA-VIIのフルオロメチルエーテルおよびジフルオロメチルエーテルアナログについてHCT116（ヒト結腸腺癌）細胞株等に対する毒性を評価し、RA-VIIと活性を比較する。
シノコクリンについては、今年度植物エキスより精製して得たシノコクリンの化学誘導により合成した中間体を用いて骨格炭素へのフッ素化反応の検討を継続する。フッ素原子の導入位置と立体配置については、NMRスペクトルおよびMacroModelを用いた配座解析により決定する。合成したフッ化アナログについて細胞毒性活性試験を実施する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度使用した原料植物素材、溶媒・試薬類等はいずれも申請者が保有していたものを使用したため、94,939円の差額が生じている。MacroModelソフトウエアの年間使用料（年間ライセンス）が、次年度も価格改訂により金額が上昇することが予告されており、次年度分として請求した助成金だけでは使用料が不足する可能性があるため、今年度の助成金の一部を次年度使用とさせていただいた。
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