研究実績の概要 |
【研究の目的】本研究は,口腔内細菌が形成するバイオフィルムを破壊し,歯周病及び種々の全身性関連疾患への罹患を予防するため,バイオフィルム破壊能を有するイオン液体と抗菌薬を内封したミセル製剤を開発し,新規洗口液としての可能性を追求するものである.本年度は,口腔内バイオフィルムに対する高い浸透性と付着性を有するミセル処方検討とin vitro歯周病菌バイオフィルム除去効果を検討した.
【実験方法】ミセル調製は転相乳化法により行った.基本処方として,非イオン性界面活性剤混合系Tween 80/Tween 20/ethanol(疎水性蛍光プローブクマリン含有)を任意の割合で混合し,イオン液体CAGEと抗菌薬クラリスロマイシン (CAM) を内封させたミセルを作製した.調製したミセルの粒子径,粒度分布,ゼータ電位,粒子画像を取得した.う蝕原因菌(Streptococcus mutans; S. mutans) を播種し,1-7 日間,35°Cで静置培養後,ウエル上に残ったものをバイオフィルムとし,ミセルを添加・インキュベーションし,クリスタルバイオレット染色による顕微鏡観察と吸光度 (A595) を測定し,バイオフィルム破壊効果を検討した.
【結果】水80wt%, Smix (Tween 80:Tween 20:Ethanol=5:4:3) 15wt%,CAGE 5wt%の処方(CAM 1 mg/ml)で, 平均粒子径7.91 nm, PDI 0.26の微小で均一なCAGEmcが得られた.また, このCAGEmcは, 4°C, 20°Cの保管条件下で少なくとも18ヶ月間安定であった. S. mutansに対するミセルのMIC及びMBC値は, いずれも市販洗口液と比較して小さく, 高い抗菌静菌・殺菌効果を有することが示された.
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