研究課題/領域番号 |
19K07361
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研究機関 | 岐阜薬科大学 |
研究代表者 |
松丸 大輔 岐阜薬科大学, 薬学部, 講師 (50624152)
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研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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キーワード | 遺伝学的アンドロゲン高産生マウス / 卵胞 / 線維化 / 細胞外マトリックス |
研究実績の概要 |
本研究は、内因性、外因性物質への生体応答の結果として起こる卵巣症状の発症メカニズムの解析を目的としている。特に、雌性における男性ホルモン応答は多嚢胞性卵胞症候群(PCOS)として顕在化し不妊の原因となりうる。本研究では、生体ストレス応答と不妊の関係を学術的な「問い」として、卵巣における酸化ストレスの標的細胞や、その上流に位置する可能性のあるホルモンシグナル、そして下流の応答分子シグナルといった細胞・分子メカニズムの解明を目指した。 2021年度は、研究活動の制限等はほとんどなかったものの、前年度の影響全てを取り戻すことはできず、全体として研究計画に遅れが生じている。成果としては、岐阜薬科大学 衛生学研究室 中西剛教授のご支援により遺伝学的アンドロゲン産生マウスの解析を進めることができた。経時的表現型解析により、同マウスにおいてはPCOS症状が4から5週齢の間に発症することを見出した。また、同マウスでは、黄体が観察されず、異常に拡大した卵胞構造が観察され、卵胞内腔に沿った顆粒膜細胞の細胞死増加、そして細胞増殖の低下が観察された。また、性ホルモン受容体の発現変化も観察され、異常卵胞においてアンドロゲン受容体、エストロゲンβ受容体の発現が減少していた。卵胞周辺においては、細胞外マトリックスの発現異常が観察された。また、遺伝子発現解析の結果として、炎症関連遺伝子の一部がアンドロゲン産生マウスにおいて高い傾向を示すことがわかったが、有意差を示さないものもあった。これは想定とは異なっていたが、排卵が生理的ダメージを引き起こすと考えられる卵巣において、PCOSモデルマウスでは排卵が起きないことに起因して炎症が顕在化しない可能性が考えられた。次年度は、この病態において酸化ストレスマーカーの変動があるかどうかの解析を行っていく予定である。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
2021年度は、2020年度の社会的な情勢等の影響からの研究活動の遅れを取り戻すことができなかった。しかし、岐阜薬科大学 衛生学研究室 中西剛教授、東北大学 加齢医学研究所 遺伝子発現制御分野 本橋ほづみ教授の全面的なご支援により、研究を遂行することができた。遺伝学的アンドロゲン高産生マウスの解析では、経時的な組織学的解析の結果から、PCOS症状の発症時期を同定することができ、マーカー分子の発現解析から性状を明らかにすることができた。さらに、遺伝子発現解析も行うことができた。しかし、酸化ストレスマーカーの発現解析を行うことができず、また、生体内代謝物質の解析、抗酸化剤を用いた症状回復実験等を行うことができなかったため、進捗状況は遅れていると判断された。
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今後の研究の推進方策 |
現在の研究環境の中で進めることのできる解析を出来る限り行うこととする。すなわち、遺伝学的アンドロゲン高産生マウス生体を準備して、PCOS症状の発症原因となりうる酸化ストレスマーカーの発現解析、ビタミン等の抗酸化剤を用いた薬理学的回復実験、また、生体内代謝物質の解析等を行う。また、組織サンプルの準備を行ったが詳細な解析に至っていない6ヶ月齢、12ヶ月齢、18ヶ月齢、24ヶ月齢、27ヶ月齢の野生型マウス、Nrf2ノックアウトマウス、Keap1ノックダウンマウスに関しても組織的な解析を進める。
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次年度使用額が生じた理由 |
2021年度は、岐阜薬科大学 衛生学研究室ですでに準備済みであったリソースを大いに活用することで多くの実験を遂行することができた。そのため、マウス管理、組織解析のための支出が少なく、前年度の影響で十分なデータが揃ったとは判断できなかったことから学会での成果発表も見送った。これらの理由により未使用額が生じた。マウス関連の飼育経費、マウス組織の解析のための試薬・抗体類の購入と、手術道具、個体サンプルの保存に用いるプラスチック器具類の購入を予定している。
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