| 研究課題/領域番号 |
19K07441
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| 研究機関 | 自治医科大学 |
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研究代表者 |
松原 大祐 自治医科大学, 医学部, 准教授 (80415554)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | Non-TRU / TFF-1 / TTF-1 / HNF4A / YAP1 / LATS2 / hippo pathway |
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| 研究実績の概要 |
CADM1が腫瘍抑制的に働く機序の解明は未だ不十分である。予備的検討で、NIH3T3でCADM1の過剰発現がYAP1活性を抑え、細胞増殖を抑制したことから、申請者は、CADM1は、Hippo pathwayを介し、腫瘍抑制的に働く可能性を考えた。肺腺癌細胞株でも、CADM1がYAP1をリン酸化し、YAP1依存性の転写を抑制した。IP assayにより、CADM1と、MST1/2、LATS1/2などのHippo pathwayのcore factorsとの複合体形成を見出した。原発性肺腺癌の免疫組織化学的解析で、CADM1とLATS2は細胞膜で共発現し、かつ、予後良好を示した。
non-TRU-type morphologyを示す原発性肺腺癌を抽出し、全エキソーム解析を行った。MutSig解析により、non-TRU-type morphology症例における特徴的な遺伝子異常として、TTF-1遺伝子変異が見つかった。non-TRU-type morphology症例は、免疫染色、遺伝子変異の解析から、TRU-type, Gastrointestinal-type、EMT-typeの３群に分かれ、その中で、最も多かったのは、TTF-1遺伝子変異/メチル化によるTTF-1失活とともに消化管上皮への異常な分化を示すGastrointestinal-typeであった。肺癌細胞株で最も多かったEMT-type（非上皮型）は、non-TRU-type morphology症例では極少数であった。
この結果を踏まえ、"上皮型"細胞株のみを集め、TTF-1の発現と逆相関する分子を抽出した。胃腸上皮分化関連分子TFF-1(Trefoil factor 1)を見出し、Non-TRU-typeの標的分子となりうるか検討した。原発性肺腺癌の免疫組織化学的解析で、TFF-1陽性例は、TTF-1陰性で、STAS像を呈し、KRAS変異を高頻度に有し、かつ、進行症例で、TFF-1は独立した予後不良因子であった。TFF-1のknock downにより、TFF-1陽性KRAS変異株のapoptosisを促進し、細胞増殖とSoft agar gelにおけるコロニー形成を抑制した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
CADM1-Hippo pathwayに関する論文は、2019年に、TFF-1に関する論文は、2020年に、それぞれ、Cancer Scienceに論文を投稿し、無事Acceptされました。
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| 今後の研究の推進方策 |
今回、注目したTFF-1は、文献的には、IgSFライブラリーとの網羅的な結合実験がなされており、いくつかのIgSFと結合して上皮の完全性を維持していると考察されている。https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0003269711006257
TFF-1のように広範な分子に結合するものは珍しく、特定の糖鎖(炭化水素)構造を認識している可能性もある。TFF-1陽性の肺腺癌は、経気腔的な肺内転移をきたすことが多く、TFF-1のこの結合性が、肺内転移と関係している可能性もあり、TFF-1の機能についてさらに検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
自分自身の自治医大から筑波大学への異動もあり、筑波大学の検体のＮＧＳ解析のための費用を残しておきたかったため。
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