2021 年度研究成果報告書

Cholix 毒素の致死性肝炎発症機構におけるエキソソームmiRNAの機能解析

研究課題

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研究課題/領域番号	19K07534
研究種目	基盤研究(C)
配分区分	基金
応募区分	一般
審査区分	小区分49050:細菌学関連
研究機関	京都薬科大学 (2021) 千葉大学 (2019-2020)
研究代表者	八尋錦之助京都薬科大学, 薬学部, 教授 (80345024)
研究期間 (年度)	2019-04-01 – 2022-03-31
キーワード	細菌毒素 / ADP-リボシル化 / PHB / マイクロアレイ解析 / miRNA / エキソソーム
研究成果の概要	コレラ菌由来外毒素 Cholix toxin (Cholix) は、N末側に宿主認識領域、C末側に毒性発現領域を持つ蛋白毒素である。宿主細胞内に侵入後、eEF2 を ADP-リボシル化し、タンパク質合成阻害活性に起因するアポトーシスを引き起こす。本研究は、ヒト由来不死化正常肝臓細胞を用い、細胞致死に至る過程での細胞内と放出されるエキソソーム内の microRNA (miRNA) を解析し、新たな細胞死亢進因子、致死過程特異的なコミュニケーション因子の同定・機能解析を行うことを目的とする。また、Cholix との相互作用する宿主細胞内蛋白質を同定する。
自由記述の分野	細菌学
研究成果の学術的意義や社会的意義	緑膿菌の産生するExoA とよく似た構造と活性を持つ Cholix は、肝障害を引き起こす毒素である。今回、Cholix の新規宿主細胞由来結合蛋白質としてProhibitin1,2 (PHB) を同定した。Cholix の細胞死に PHB が関与している事が分かった。ヒト由来不死化正常肝臓細胞を用いて Cholix による細胞内の mRNA, miRNA の網羅的解析（RNAseq 解析、マイクロアレイ解析）を行った。この解析結果は、これまで未知であった ADP-リボシル化による細胞死において、新規の宿主障害機構を見い出す貴重な基礎データとなると確信している。