研究実績の概要 |
カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス(KSHV、ヒトヘルペスウイルス8、HHV8)には12個のpre-miRNAがコードされており、pre-miRNAの5p, 3p側の2つのmiRNAが産生される。これまでの研究から、カポジ肉腫やprimary effusion lymphomaなどのKSHV感染症の病変部では、miR-K3の5pが最も多量に発現しているKSHV関連miRNAであることを明らかにしてきたが、今回、miR-K3の機能を明らかにする目的で、発現レンチウイルスを用い、ヒトリンパ腫細胞株や293細胞などにmiR-K3を強制発現させた。同時にmiR-K3の機能を抑制するsiRNAの発現系も作成し、KSHV感染細胞におけるmiR-K3の機能抑制を試みた。これらの細胞からRNAを抽出し、次世代シークエンサーによりRNAseqを行い、miR-K3によって発現が変動する遺伝子のプロファイル、および、KSHV感染細胞でmiR-K3の機能を抑制した場合に変化する遺伝子群の同定を行った。結果、miR-K3は細胞増殖に係るシグナル伝達系の活性化を誘導することが明らかにされた。また、JCポリオーマウイルス(JCV)が発現するRNAについて、昨年作成したJCVが効率よく産生される実験細胞系において、次世代シークエンサーによりRNAseqを行い、JCVの様々なRNA産物の解析を行い、報告されているmRNA以外の遺伝子も同定された。
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