| 研究課題/領域番号 |
19K07639
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
梶原 健太郎 大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (30581102)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | 腎細胞がん / CDCP1 / Met / HGF |
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| 研究実績の概要 |
腎がんの罹患率、死亡率はともに増加傾向にあるが、腎がんの発症、悪性化に至る全体像は不明のままである。申請者は、腎臓の修復に関わるタンパク質として新たにCDCP1を同定した。このCDCP1は幹細胞マーカーとしての報告があるが、様々な疾患時に増加するだけでなく、腎がんの患者においても発現の上昇が認められており、予後不良とも関連が認められている。本研究では、CDCP1と協調的に機能する肝細胞増殖因子（HGF）の受容体Metとの関連を軸に、「腎臓の再生と機能維持」と「腎がんの進展と悪性化」というCDCP1の二面性を明らかにして、腎がん発症の理解と抑制を目指した基礎研究を展開する。
腎臓の再生と機能維持： CDCP1とMetのダブルノックアウトマウスの作出に至り、その解析を実施した。これまでに通常の生育条件では顕著な影響がないことを確認した。
腎がんの進展と悪性化： がん細胞のCDCP1ノックダウンの影響を解析した。ノックダウンによってMetの発現量が減少し、HGF刺激後のシグナル伝達および浸潤の亢進が抑制されることを確認した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
CDCP1とMetの生理的な協調的機能を解析するために、それぞれの単独のノックアウト（KO）マウスおよびダブルノックアウト（DKO）マウスを作出した（Met KOマウスは上皮組織特異的にノックダウン可能なマウスである）。現在、DKOマウスを用いた解析をおこなっているが、通常の生育条件で顕著な異常は認められなかった。今後さらなる解析が必要である。
がん細胞の浸潤におけるCDCP1の関与を解析した。これまでに浸潤性の腎細胞がん細胞および乳がん細胞のCDCP1のノックダウンによって、HGF刺激後の浸潤が抑制されることを明らかにしていた。本年度はその原因を解析した。その結果、CDCP1のノックダウンによって、Metの発現量が低下を確認した。これに対応するように、HGF刺激後の細胞内タンパク質のチロシンリン酸化レベルが低下しており、さらにSrcなどの下流のシグナル伝達の減弱を明らかにした。くわえてHGFによって発現が亢進する遺伝子群では、その変化が抑制されていた。上記の結果から、CDCP1のノックダウンによってHGF-Metシグナル全体が減弱し、浸潤を含む様々な表現型が抑制されることを明らかにした。すなわち、CDCP1はMetと協調的に機能しており、増殖因子によるがん悪性化の進展に重要であることを明らかにした。
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| 今後の研究の推進方策 |
CDCP1とMetのDKOマウスの作出に至ったが、通常の生育条件では顕著な影響は認められなかった。今後は腎臓に生理的ストレスを与えた条件（片腎切除、虚血再還流など）での解析を実施する。
がん細胞の解析では、CDCP1のノックダウンによってMetの発現量が減少し、HGF刺激後の浸潤の亢進が抑制されることを確認した。今後は実際の腫瘍環境を再現したヘテロな細胞集団内でのCDCP1高発現細胞と低発現細胞の振る舞いを解析する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
理由： COVID-19による緊急事態宣言（大阪府）により、計画通りに研究を実施することができなかったため。また、出張の制限によって、旅費の支出がなかったため。
今後の使用計画： 未実施の実験を効率良く行うため、解析に必要な物品を追加で購入する。また、旅費の使用計画も見直し、物品費や解析費用にあてる。
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