研究課題
小細胞肺がんは肺がんの中で最も進行が速く、多くの患者は再発し治療抵抗性を示す。5年生存率は７％以下と極めて予後不良にも関わらず、新規治療開発から長らく取り残されている。CD19抗原を標的とするキメラ抗原受容体(CAR)T細胞療法はB細胞性急性リンパ性白血病に対し80％以上の寛解率を得ることができ、本邦でも薬事承認されたが、固形がんに対するCART療法は腫瘍微小環境の問題もあり期待した抗腫瘍効果が得られず、また副作用も懸念である。申請者らは疲弊したCTLをiPSC技術で若返らせることに成功後、もとのCTLより強い腫瘍縮小効果と生存期間延長をin vivoで証明した。本研究では小細胞肺がんの多くが細胞表面にGD2を発現することに着目し、先行技術の応用によりiPSCにGD2-CARを遺伝子導入後、若返りGD2-CARTを分化誘導し、小細胞肺がんに強力な治療となりうるか検証する。初年度はGD2-CARを遺伝子導入するためのiPSCを健常人ドナーより樹立した。その後レンチウイルスGD2-CARベクターを産生した。しかしウイルスタイターが低かったため、標識となるmcherryをCARと2A sequenceで繋げることによりベクター産生効率、遺伝子導入効率を容易に可視化できるようにした。結果的にGD2-CARベクターを効率よく産生することに成功し、iPSCに遺伝子導入後数回GD2-CAR陽性細胞をソートして、現在GD2-CAR-iPSCより若返りGD2-CARTを分化誘導している。また標的細胞として、患者ドナー胸水より分離したGD2陽性小細胞肺がん細胞を長期培養し、継代することに成功した。今後若返りGD2-CART細胞の小細胞肺がんへの抗腫瘍効果の評価を行う予定となっている。
2: おおむね順調に進展している
GD2-CARと2A sequenceでmcherryを繋げることによりベクター産生効率、遺伝子導入効率を容易に解析できるようにした。結果的にGD2-CARベクターを効率よく産生することに成功し、iPSCに遺伝子導入後数回GD2-CAR陽性細胞をソートして、現在GD2-CAR-iPSCより若返りGD2-CARTを分化誘導している。また標的細胞として、患者ドナー胸水より分離したGD2陽性小細胞肺がん細胞を長期培養し、継代することに成功した。今後若返りGD2-CART細胞の小細胞肺がんへの抗腫瘍効果の評価を行う予定となっている。概ね予定通りであり計画は順調に進んでいると考える。
今後小細胞肺がん細胞株を用い、若返りGD2-CART細胞の小細胞肺がんへの抗腫瘍効果の評価を行う予定となっている。
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