2022 年度実施状況報告書

NASH発症におけるRAGE発現亢進のメカニズム解明と肝線維化マーカー開発

研究課題

研究課題/領域番号	19K07914
研究機関	高知大学
研究代表者	廣瀬享高知大学, 教育研究部医療学系臨床医学部門, 講師 (30457395)
研究分担者	越智経浩高知大学, 教育研究部医療学系基礎医学部門, 助教 (30617840) 小野正文香川大学, 医学部, 寄附講座教員 (70304681)
研究期間 (年度)	2019-04-01 – 2024-03-31
キーワード	NAFLD / 肝線維化 / RAGE
研究実績の概要	これまで我々は、NASH患者および動物モデルの肝臓における線維化進展とRAGEとの関係について検討したところ、NASH患者および動物モデルの肝臓においてRAGEの発現が亢進し、またRAGE欠損マウスにおいてNASHの肝線維化が抑制されることを示し、肝線維化進展におけるRAGEの重要性について報告してきた。しかしその分子メカニズムについては十分に解明されていない。そこで、WTマウスにコントロール食を投与した場合に比べ、RAGE欠損マウスに対してコントロール食を投与した場合はRAGEのRNA発現量は有意に低値であった。さらにMCD食を負荷するとWTマウスではRAGEのRNA発現量は増加するのに対して、RAGE欠損マウスではMCD食を負荷してもRAGEのRNA発現量は有意に低値であった。また肝でのTGF-β、CTGF、α-SMA、type 1 collagen-α1、TIMP-1、TNF-α、Nos2の発現量は、RAGE KOマウスでは有意に低値であった。mDia1（Mannmalian diaph 1)は、細胞骨格に関連する蛋白であり、RAGEに対しての膜結合蛋白であるが、WT-MCDマウスではRAGE、mDia1ともにRNAの発現量は増加しているが、WT-MCDマウスの肝星細胞に共局在していることが明らかになった。対照的にWT-MCDマウスのクッパ-細胞ではRAGEは過剰発現しているが、mDia1は検出されなかった。肝星細胞におけるmDia1の過剰発現と共局在化がmDia1の活性化に関連している可能性が示唆された。
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 2: おおむね順調に進展している理由 RAGEの下流に存在するmDie1の肝におけるRNA発現量および蛋白の発現量を評価したところ、WT-MCDマウスではmDia1は高発現しているのに対して、RAGE-KO-MCDマウスでのRNA発現量および蛋白発現量はWT-MCDマウスに比べ低下していた。またWT-MCDマウスではRAGE、mDia1ともにRNAの発現量は増加しているが、WT-MCDマウスの肝星細胞に共局在していることが明らかになった。対照的にWT-MCDマウスのクッパ-細胞ではRAGEは過剰発現しているが、mDia1は検出されなかった。肝星細胞におけるmDia1の過剰発現と共局在化がmDia1の活性化に関連している可能性が示唆され、RAGE及びmDia1の局在が線維化進展に関与している可能性が示唆され、新たな研究課題を創出できた。本年度の予定としては概ね良好な進捗状況である。
今後の研究の推進方策	WT-MCDマウスではRAGE、mDia1ともにRNAの発現量は増加しているが、WT-MCDマウスの肝星細胞に共局在していることが明らかになった。対照的にWT-MCDマウスのクッパ-細胞ではRAGEは過剰発現しているが、mDia1は検出されなかった。肝星細胞におけるmDia1の過剰発現と共局在化がmDia1の活性化に関連している可能性が示唆された。今後はRAGE-KO-MCDマウスにおけるRAGE、mDia1のRNA発現量およびRAGE及びmDia1の局在、WT-MCDマウスとの違差を検討し、線維化進展のメカニズムについて更に検討していく。