マウスモデルを用いた再生不良性貧血の新規遺伝子機能解析

2021 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19K08297
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 成田 敦 名古屋大学, 医学部附属病院, 助教 (20625149)
• 研究分担者: 奥野 友介 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 教授 (00725533) ; 高橋 義行 名古屋大学, 医学系研究科, 教授 (40432273)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2022-03-31
• キーワード: 再生不良性貧血 / 網羅的遺伝子解析

研究実績の概要

小児AA患者41症例の全エクソーム解析を通じて、新規遺伝子Xの体細胞変異を2例で同定した。さらに、小児AA140症例についてPyro sequencing法を実施し、8症例（6%）で同様に遺伝子Xの変異を確認した。遺伝子Xの変異マウスモデルを用いて、AAにおける新規遺伝子Xの変異アリルの機能的意義を検討した。
遺伝子Xの変異マウスおよび野生型マウス由来の骨髄細胞を採取し、コロニーアッセイを実施した。10日後にアッセイで得られたCFUGM、BFU-Eをカウントしたが、両者でコロニー増殖能に差異を認めなかった。さらに、遺伝子Xの変異マウスおよび野生型マウス由来の骨髄細胞からRNAを抽出して、RNAシーケンスにより転写産物の発現を比較検討した。遺伝子Xの変異マウスで優位に発現している遺伝子のうち、造血に関与するものはみられなかった。また、AA患者の一部では、T細胞からの免疫攻撃から逃れるためにHLAの欠失がみられることが知られている。遺伝子Xの変異マウス、野生型マウス由来の骨髄におけるMHC（MajorHistocompatibility Antigen Complex）の欠失についてFACSCaliberを用いて比較検討したが、いずれもMHCの欠失を認めなかった。
遺伝子Xの変異マウスの増殖優位性を示すために骨髄移植実験を行った。遺伝子Xの変異マウスモデルはB6Nマウス由来である。X遺伝子変異マウス、野生型マウスをドナーとして、BALB/cマウスに競合移植を実施した。AAの病態であるT細胞からの免疫学的攻撃を再現するために、GVHDモデル移植実験を参考にして、BALB/c由来の脾臓（T細胞）を同時に移植した。キメリズム解析により両者増殖能の比較を実施したところ、有意差を認めなかった。以上の結果からは遺伝子Xの変異マウスの血球に増殖優位性はみられないと考えられた。

研究成果

• [雑誌論文] Minor PNH clones do not distinguish inherited bone marrow failure syndromes from immune-mediated aplastic anemia (2022)
  • 著者名/発表者名: Narita Atsushi、Miwata Shunsuke、Imaya Masayuki、Tsumura Yusuke、Yamamori Ayako、Wakamatsu Manabu、Hamada Motoharu、Taniguchi Rieko、Okuno Yusuke、Muramatsu Hideki、Takahashi Yoshiyuki
  • 雑誌名: Blood Advances 巻: 6 ページ: 2517～2519
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2021006044
  • 査読あり
• [雑誌論文] 綜説 血球テロメア長測定の臨床的意義 (2022)
  • 著者名/発表者名: 成田 敦
  • 雑誌名: 小児科 巻: 63 ページ: 199～206
  • DOI: 10.18888/sh.0000002074
• [雑誌論文] Prospective validation of the provisional entity of refractory cytopenia of childhood, proposed by the World Health Organization (2021)
  • 著者名/発表者名: Hama Asahito、Hasegawa Daisuke、Manabe Atsushi、Nozawa Kazue、Narita Atsushi、Muramatsu Hideki、Kosaka Yoshiyuki、Kobayashi Masao、Koh Katsuyoshi、Takahashi Yoshiyuki、Watanabe Kenichiro、Ohara Akira、Ito Masafumi、Kojima Seiji
  • 雑誌名: British Journal of Haematology 巻: 196 ページ: 1031～1039
  • DOI: 10.1111/bjh.17921
  • 査読あり
• [雑誌論文] Simple and robust methylation test for risk stratification of patients with juvenile myelomonocytic leukemia (2021)
  • 著者名/発表者名: Kitazawa Hironobu、Okuno Yusuke、Muramatsu Hideki、Aoki Kosuke、Murakami Norihiro、Wakamatsu Manabu、Suzuki Kyogo、Narita Kotaro、Kataoka Shinsuke、Ichikawa Daisuke、Hamada Motoharu、Taniguchi Rieko、Kawashima Nozomu、Nishikawa Eri、Narita Atsushi、et.al
  • 雑誌名: Blood Advances 巻: 5 ページ: 5507～5518
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2021005080
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Integrated diagnosis based on transcriptome analysis in suspected pediatric sarcomas (2021)
  • 著者名/発表者名: Ichikawa Daisuke、Yamashita Kyoko、Okuno Yusuke、Muramatsu Hideki、Murakami Norihiro、Suzuki Kyogo、Kojima Daiei、Kataoka Shinsuke、Hamada Motoharu、Taniguchi Rieko、Nishikawa Eri、Kawashima Nozomu、Narita Atsushi、Nishio Nobuhiro、Hama Asahito、Kasai Kenji、Mizuno Seiji、Shimoyama Yoshie、Nakaguro Masato、et.al
  • 雑誌名: npj Genomic Medicine 巻: 6 ページ: －
  • DOI: 10.1038/s41525-021-00210-y
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Autoantibodies against the plakin family proteins as a novel marker for chronic graft-versus-host disease of the lung (2021)
  • 著者名/発表者名: Kawashima Nozomu、Nishikawa Eri、Tsuchisaka Atsunari、Hashimoto Takashi、Okuno Yusuke、Hamada Motoharu、Ichikawa Daisuke、Narita Atsushi、Muramatsu Hideki、Nishio Nobuhiro、Kojima Seiji、Muro Yoshinao、Takahashi Yoshiyuki
  • 雑誌名: Bone Marrow Transplantation 巻: 56 ページ: 2291～2294
  • DOI: 10.1038/s41409-021-01335-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Echocardiography Monitoring of Pulmonary Hypertension after Pediatric Hematopoietic Stem Cell Transplantation: Pediatric Pulmonary Arterial Hypertension and Pulmonary Veno-Occlusive Disease after Hematopoietic Stem Cell Transplantation (2021)
  • 著者名/発表者名: Kawashima Nozomu、Fukasawa Yoshie、Nishikawa Eri、Ohta-Ogo Keiko、Ishibashi-Ueda Hatsue、Hamada Motoharu、Ichikawa Daisuke、Narita Atsushi、Okuno Yusuke、Muramatsu Hideki、Nishio Nobuhiro、Kojima Seiji、Kato Taichi、Takahashi Yoshiyuki
  • 雑誌名: Transplantation and Cellular Therapy 巻: 27 ページ: 786.e1～786.e8
  • DOI: 10.1016/j.jtct.2021.05.017
  • 査読あり
• [雑誌論文] Relationship between plasma rabbit anti‐thymocyte globulin concentration and immunosuppressive therapy response in patients with severe aplastic anemia (2021)
  • 著者名/発表者名: Narita Atsushi、Muramatsu Hideki、Ichikawa Daisuke、Hamada Motoharu、Nishikawa Eri、Suzuki Kyogo、Kawashima Nozomu、Okuno Yusuke、Nishio Nobuhiro、Hama Asahito、Yamazaki Hirohito、Nakao Shinji、Kojima Seiji、Takahashi Yoshiyuki
  • 雑誌名: European Journal of Haematology 巻: 107 ページ: 255～264
  • DOI: 10.1111/ejh.13644
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical diagnostic value of telomere length measurement in inherited bone marrow failure syndromes (2021)
  • 著者名/発表者名: Miwata Shunsuke、Narita Atsushi、Okuno Yusuke、Suzuki Kyogo、Hamada Motoharu、Yoshida Taro、Imaya Masayuki、Yamamori Ayako、Wakamatsu Manabu、Narita Kotaro、Kitazawa Hironobu、Ichikawa Daisuke、Taniguchi Rieko、Kawashima Nozomu、Nishikawa Eri、Nishio Nobuhiro、Kojima Seiji、Muramatsu Hideki、Takahashi Yoshiyuki
  • 雑誌名: Haematologica 巻: 106 ページ: 2511～2515
  • DOI: 10.3324/haematol.2021.278334
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Successful treatment of a novel type I interferonopathy due to a de novo PSMB9 gene mutation with a Janus kinase inhibitor (2021)
  • 著者名/発表者名: Kataoka Shinsuke、Kawashima Nozomu、Okuno Yusuke、Muramatsu Hideki、Miwata Shunsuke、Narita Kotaro、Hamada Motoharu、Murakami Norihiro、Taniguchi Rieko、Ichikawa Daisuke、Kitazawa Hironobu、Suzuki Kyogo、Nishikawa Eri、Narita Atsushi、Nishio Nobuhiro、et.al
  • 雑誌名: Journal of Allergy and Clinical Immunology 巻: 148 ページ: 639～644
  • DOI: 10.1016/j.jaci.2021.03.010
  • 査読あり
• [雑誌論文] 【小児で経験する「血液の異常」-血液疾患の鑑別とトピックス】各論:汎血球減少症 再生不良性貧血 (2021)
  • 著者名/発表者名: 成田 敦
  • 雑誌名: 小児内科 巻: 53 ページ: 1137～1140
• [学会発表] OUTCOME OF HAEMATOPOIETIC CELL TRANSPLANTATION IN CHILDREN WITH FANCONI ANAEMIA: A SINGLE- CENTERE EXPERIENCE (2021)
  • 著者名/発表者名: Atsushi Narita, Yusuke Tsumura, Ryo Maemura, Masayuki Imaya, Ayako Ymamori, Taro Yoshida, Manabu Wakamatsu, Shunsuke Miwata, Koutaro Narita, Rieko Taniguchi, Motoharu Hamada, Eri Nishikawa, Nozomu Kawashima, Yusuke Okuno, Hideki Muramatsu, Nobuhiro Nishio, Seiji Kojima, and Yoshiyuki Takahashi
  • 学会等名: 第43回日本造血細胞移植学会総会
• [学会発表] Clinical diagnostic value of telomere length measurement in inherited bone marrow failure syndromes (2021)
  • 著者名/発表者名: Atsushi Narita, Shunsuke Miwata, Yusuke Okuno, Motoharu Hamada, Masayuki Imaya, Ayako Yamamori, Manabu Wakamatsu, Shinsuke Kataoka, Rieko Taniguchi, Nozomu Kawashima, Eri Nishikawa, Nobuhiro Nishio, Seiji Kojima, Hideki Muramatsu, Yoshiyuki Takahashi
  • 学会等名: 9th International Symposium on MDS and SAA in childhood
  • 国際学会
• [学会発表] Blinatumomab in pediatric patients with relapsed/refractory B-cell precursor acute lymphoblastic leukemia (2021)
  • 著者名/発表者名: Atsushi Narita, Daichi Sajiki, Yusuke Tsumura, Ryo Maemura, Masayuki Imaya, Ayako Yamamori, Manabu Wakamatsu, Rieko Tainguchi, Motoharu Hamada, Shinsuke Kataoka, Eri Nishikawa, Nozomu Kawashima, Yusuke Okuno, Hideki Muramatsu, Nobuhiro Nishio, and Yoshiyuki Takahashi
  • 学会等名: 第83回日本血液学会学術集会
• [学会発表] Urinary biomarkers predicting treatment outcomes in neuroblastoma. (2021)
  • 著者名/発表者名: Atsushi Narita, Akinari Hinoki, Kazuki Yokota, Motoharu Hamada, Shinsuke Kataoka, Nozomu Kawashima, Hideki Muramatsu, Nobuhiro Nishio, Hiroo Uchida, and Yoshiyuki Takahashi
  • 学会等名: 第63回日本小児血液・がん学会