| 研究分担者 |
源 利成 金沢大学, がん進展制御研究所, 教授 (50239323)
澤田 武 名古屋市立大学, 医薬学総合研究院(医学), 研究員 (60345626)
山本 英一郎 札幌医科大学, 医学部, 訪問研究員 (60567915)
佐々木 泰史 札幌医科大学, 医療人育成センター, 教授 (70322328)
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| 研究実績の概要 |
本研究の目的は、遺伝子発現プロファイルの解析と融合遺伝子の探索により、大腸鋸歯状腺腫（traditional serrated adenoma, TSA）を前癌病変とする発癌経路の確立と、その分子機構の解明を行うことであった。しかし、発現解析に適した病変が十分得られなかったため、従来行っていた鋸歯状病変における遺伝子変異、メチル化、免疫組織化学の解析をさらに進めることとした。
具体的には、無茎性鋸歯状腺腫（sessile serrated adenoma, SSA）18病変、TSA 37病変を含む計78病変の鋸歯状病変を対象とした。まず、ホルマリン固定パラフィン包埋標本からDNAを抽出した。Wntシグナル経路関連の16遺伝子を含む計39遺伝子をパネル化し、次世代シーケンスで全エクソンの変異解析を行った。また、ゲノムワイドなメチル化であるCpG island methylator phenotype（CIMP）のマーカー遺伝子、MLH1, CDKN2A, SMOC1を含む癌関連遺伝子のメチル化解析をパイロシーケンス法で行った。さらに、Wntシグナル経路の亢進を確認するため、39鋸歯状病変（SSA 13 病変、TSA 14病変、過形成性ポリープ 12病変）を対象に、免疫組織化学でβ-カテニン蛋白の発現を評価した。
結果、Wntシグナル関連遺伝子変異とβ-カテニンの核内集積はTSAに高頻度であり、TSAの発生におけるWntシグナル経路の重要性が確認された。SMOC1遺伝子メチル化はSSAにみられず、TSAにのみ観察されたことと合わせ、TSAはSSAとは異なる発癌経路に属しているものと考えられた。また、TSAをKRAS変異陽性病変、BRAF変異陽性病変に分けると、RNF43変異頻度、SMOC1メチル化頻度は両者で異なっており、TSAを介した発癌経路が複数存在することが示唆された。
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