2020 年度実施状況報告書

肝がん微小環境での免疫編集に関わるHLA-classII発現変化と制御機構の解析

研究課題

研究課題/領域番号	19K08464
研究機関	福井大学
研究代表者	平松活志福井大学, 学術研究院医学系部門(附属病院部), 准教授 (30646849)
研究期間 (年度)	2019-04-01 – 2022-03-31
キーワード	M2 マクロファージ
研究実績の概要	肝癌合併C型肝硬変患者（13症例）の手術標本（ホルマリン固定, パラフィン包埋標本）よりスライド標本を作成し, 計9種類の抗体（HLA-DPB1, CD68, CD163, CD11c, CD11b, CD14, CD4, CD8, FoxP3）による新規蛍光多重免疫染色（OPALTM：Parlkin-Elmar社）を行い, 各蛍光強度をデジタル解析した. HLA発現亢進群の癌部にHLA-DPB1陽性かつCD68, CD163陽性を示すM2 マクロファージが有意に多く浸潤していた（80 vs 22, 蛍光強度/１M pixel, P<0.05）. さらにT細胞マーカーであるCD4, CD8およびFoxP3による多重免疫染色ではFoxP3陽性CD8細胞が有意に多く浸潤していた（92 vs 32, 蛍光強度/１M pixel, P<0.05）. HLA遺伝子の発現が亢進している肝癌は, 非硬変肝に発生する比較的大きな腫瘍という特徴をもち, M2 マクロファージやFoxP3陽性CD8細胞の浸潤により免疫抑制性の微小環境が形成されていた.
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 2: おおむね順調に進展している理由予定通り、多重免疫染色での解析を行っており、順調に進展していると判断する。
今後の研究の推進方策	腫瘍浸潤マクロファージのさらなるフェノタイプ解析を進めたい。
次年度使用額が生じた理由	本年度の蛍光免疫染色では次世代シークエンサー解析に比しコストが低い。次年度は蛍光免疫染色および次世代シークエンサー解析の両者を行って、使用する予定である。