研究課題/領域番号 |
19K08640
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研究機関 | 国立感染症研究所 |
研究代表者 |
本田 尚子 国立感染症研究所, 品質保証・管理部, 協力研究員 (40600911)
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研究分担者 |
深澤 秀輔 国立感染症研究所, 品質保証・管理部, 主任研究官 (10218878)
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研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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キーワード | 抗酸菌 / GC-MS / 揮発性代謝産物 / VOC / 呼気 |
研究実績の概要 |
結核ワクチン M. bovis BCG株と非結核性抗酸菌 M. smegmatisの揮発性代謝産物(VOCs)をシリカモノリスに吸着させ、ジクロロメタンで抽出しGC-MSで測定した。 測定データをMS-DIALによりピーク同定し、特徴的な成分をMetaboAnalystにより抽出した。全卵を含む小川培地、無機塩類で作成するSauton培地、BSAを含む汎用される7H10培地で比較した。Methyl phenylacetate, Methyl p-anisate, Methyl nicotinateは結核菌に特徴的なVOCsであり、ワクチン株のBCG Danish株からは検出されないとされていたが、Tokyo株の主要なVOCsであることが分かった。また匂い合成に関わると推定されている2種のメチル基転移酵素の候補はいずれのワクチン株にもコードされていた。BCGを増殖させた7H10プレートにストレプトマイシンやリファンピシンを添加すると、添加後に発生するこれら3つの 匂いは顕著に減少したことから、増殖に伴って発生する匂いと考えられ、抗結核薬の効果の有無の指標になることが示唆された。 非結核性抗酸菌症は病状の進行の予測が困難であり、抗菌薬を服薬しても、効果が出ているのか判断が難しい。また喀痰から菌が検出できるとも限らない。肺MAC症の原因菌の1つであるM. avium compleからはMethyl phenylacetateが検出されたと報告されているので、呼気から匂いを検出することで、抗菌薬の効果の有無を推測できる可能性が示唆される。 シリカモノリスを不織布で包んでマスクの内側に固定し、6時間着用したところ、多数のピークが検出されたがMethyl phenylacetate等は検出されなかったことから、既報通り非感染者にはない、もしくは十分に少ないことを確認した。
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現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
研究時間の確保が予想に反して困難となり遅れた。
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今後の研究の推進方策 |
BSL-2におけるGC-MS使用環境が整い次第、非結核性抗酸菌や呼気のVOCs、感染マクロファージのVOCsを測定していきたい。
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次年度使用額が生じた理由 |
研究の遅れにより消耗品を購入せず、使用時直前に購入するため。
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