| 研究課題/領域番号 |
19K08707
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| 研究機関 | 熊本大学 |
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研究代表者 |
谷川 俊祐 熊本大学, 発生医学研究所, 講師 (10726318)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | ネフリン / iPS / 病態再現 / 糸球体 / 腎臓 / オルガノイド |
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| 研究実績の概要 |
ネフリンは糸球体の濾過膜 （スリット膜）を構成する主要タンパク質であり、その異常は蛋白尿を引き起こす。しかし濾過膜を直接修復して蛋白尿を消失させる根治的治療法は存在せず、保存的治療にとどまっている。
これまでの研究は、汎用性の高い株化細胞系を利用したタンパク質の過剰発現系による解析が主流であり、腎臓のネフロン構造や糸球体のスリット膜形成能を持たないためネフリンタンパク質の動態と病態との関連を直接解析することができなかった。
我々は、先天性ネフローゼ患者由来のiPS細胞から糸球体を誘導することによって、濾過膜を含む初期病態を再現し、ネフリンの膜移行が疾患原因であることを証明した（Tanigawa et al. Stem Cell Reports, 2018）。そこで本計画では、糸球体濾過膜を再構築できる唯一の実験系であるこの誘導法を基盤にして、ネフリンタンパク質の動態メカニズム（タンパク質発現から膜移行局在、糖鎖修飾とリン酸化による成熟化、タンパク質代謝）を解明するとともに、スリット膜の形成及び再生を促進するシグナル・化合物の同定を目的としている。
本年度は、先天性ネフローゼ患者由来の腎臓オルガノイドを用いてネフリンタンパク質の発現や局在を制御すると予測される化合物を中心にスクリーニングを実施した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
腎臓オルガノイドを用いたネフリンタンパク質の発現を制御する薬剤スクリーニングの結果、複数の候補薬剤を得た。それらの作用機序からこれまでに明らかでないネフリンタンパク質の動態解明が期待できるため。
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| 今後の研究の推進方策 |
スクリーニングによって得られた候補薬剤の最適濃度、処理時間を確定する。その効果は腎臓オルガノイドを用いてスリット膜前駆体形成能やネフリンの膜局在化を組織レベルで評価する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
解析費用の単価が高いシングルセル解析を次年度に実施するため。
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