| 研究実績の概要 |
抗PD-1抗体治療の効果に関するバイオマーカーの中でも、効果の中心を担う重要な腫瘍特異的T細胞の制御に直接関わる分子を探索し、その分子の機能を解析し、治療標的としての有用性までを検証する計画である。抗PD-1抗体治療前、治療後のメラノーマ組織ペア、あるいは再発症例の再発病変組織を用いてtumor digest、がん細胞株、腫瘍浸潤T細胞株を4ペア作成した。がん細胞株と腫瘍浸潤T細胞株を共培養し、腫瘍浸潤T細胞の中の腫瘍特異的T細胞を同定、クローニングし、それぞれの腫瘍特異的T細胞のT細胞受容体(TCR)遺伝子型を同定した。ここで最初に保存したTumor digestに戻り、T細胞を抽出した上でsingle cell RNA sequence解析を行い、フェノタイプによってT細胞をクラスタリングし、その中から腫瘍特異的なTCR遺伝子型をもつT細胞の所属するクラスターを同定した。そして最終的に、このクラスターの遺伝子発現プロファイルより、腫瘍特異的T細胞に選択的に発現され、その制御に直接関わる分子を複数同定した。その中にはすでに腫瘍内で腫瘍特異的T細胞に発現されることが知られているPD-1, TIGIT, LAG3なども含まれていたため、今回の研究手法の有効性が証明された。TIGITについてはがん細胞側に発現されるそのリガンド、CD155が抗PD-1抗体の治療抵抗性に関与することを約100例の免疫染色にて証明した。また腫瘍内で腫瘍特異的T細胞に発現される新規分子も複数同定し、現在それらを利用した新規がん免疫療法の開発に向けてさらなる検証を行っている。さらにより多くの新規症例についても、同様の手法による新規分子の検索を継続中である。
|
