| 研究課題/領域番号 |
19K08800
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| 研究機関 | ヤマザキ動物看護専門職短期大学 |
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研究代表者 |
藤村 響男 ヤマザキ動物看護専門職短期大学, 動物トータルケア学科, 教授 (50209087)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | ハンセン病 / 感染様式 / 侵入蛋白 / ワクチン |
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| 研究実績の概要 |
我々はこれまで、らい菌の細胞侵入に関わる分子機構につき解析を行い、らい菌がmce1蛋白を用いて鼻粘膜上皮細胞を標的として感染する事、及びmce1蛋白の一部領域をブロックすることで侵入を抑制できることを明らかにしてきた。本研究の目的は、ワクチン開発ヘの基礎的検討の最終段階として、らい菌の体内への侵入経路である鼻粘膜細胞とリザーバーである微小血管内皮細胞への侵入に関わる蛋白の各部位を標的とした各種抗体を用いて侵入抑制効果を検討すると共に、ハンセン病患者におけるmce1蛋白に対する抗体の有無およびサブクラスについても併せ検討するところにある。
これまでの研究結果から想定された侵入活性領域（316～531bpの領域）を316-387bp (106-129AA)、388-453bp (130-151AA)、454-486bp (152-162AA)、及び487-531bp (163-177AA)に4分割して、夫々の領域に対する高度免疫血清を作製し、316bp-531bp(72AA領域)を外膜表示した組換え大腸菌を用いて侵入抑制効果を検討した結果、106-129アミノ酸と130-151アミノ酸を免疫原に作製した高度免疫血清（Inv Xa抗体とInv Xb抗体）に侵入抑制効果が認められた。昨年度は、新たにInv XaとInv Xbにまたがる領域(121-144AA)に対する高度免疫血清を作製し、侵入活性が最も抑制されることを明らかにした。このことから、らい菌の鼻粘膜上皮細胞への侵入においてmce1A蛋白InvX領域の121～144AAに対する抗体でらい菌の鼻粘膜上皮細胞への侵入を抑制できる可能性が示唆された。今年度は、安定した継続的な実験を行うため、Inv XaとInv Xbにまたがる領域(121-144AA)に対する単クローン抗体の作製を行い、数種の単クローン抗体を得つつある。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
新型コロナウィルスへの対応で一定期間研究活動の自粛を余儀なくされたこと、並びに、インドネシアへの渡航規制によりハンセン病の多発地域における現地調査と血清の収集が延期されたままとなっている為。
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| 今後の研究の推進方策 |
得られた単クローン抗体の性状を検討しつつ、鼻粘膜上皮細胞への侵入抑制効果を侵入活性領域を外膜表示した組換え大腸菌を用いて検討し、最も侵入抑制効果を示すクローンを選択する。組換え大腸菌で効果が確認できた単クローン抗体を用いて、らい菌に対する侵入抑制効果を検討する。更に渡航規制解除後は、速やかにインドネシアで現地調査を行い、臨床応用に向けてハンセン病患者におけるmce1蛋白に対する抗体の有無およびサブクラスについて併せ検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
新型コロナウィルス感染症に伴う渡航規制により国外出張（インドネシア共和国における現地調査）が行えなかった為、次年度に実施することにしたことによる差額である。渡航規制解除後に速やかにインドネシア共和国を訪問し、現地調査を実施する。
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