KIRアリル多型に着目した造血幹細胞移植における免疫の最適化

2019 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 19K08812
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 進藤 岳郎 京都大学, 医学研究科, 助教 (10646706)
• 研究分担者: 高折 晃史 京都大学, 医学研究科, 教授 (20324626) ; 伊村 明浩 京都大学, 医学研究科, 特定病院助教 (60362513)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2022-03-31
• キーワード: KIRアレル / 次世代シークエンサー / NK細胞活性 / KIRシグナル

研究実績の概要

第一にKIRアレルの新規タイピング法確立に向けて、各アレル遺伝子のプライマー設計を行った。具体的には1500検体に及ぶ日本人検体の全ゲノムシークエンス結果に基づいた解析を行い、BLASTデータに基づいた検証も並行して行った。
第二に本邦で造血幹細胞移植を受けた成人T細胞白血病（Adult T-cell Leukemia: ATL）の保存検体を用いた臨床研究に関して、本学および造血細胞移植データセンターで2019年12月に倫理承認を得た。日本骨髄移植推進財団と日本造血細胞移植学会は、本邦で実施された非血縁者間同種骨髄移植のドナーおよびレシピエントのDNAを収集し、日本赤十字社で保管している。また各移植の臨床情報とHLAデータは日本造血細胞移植データセンターに保存され、連結可能匿名化されている。DNAの収集は文書による同意を得て行われ、それらを用いた後方視的遺伝子解析研究は日本造血細胞移植学会で倫理審査を受け、承認されている。
第三にHLA欠失細胞株および特定のHLAを遺伝子導入した細胞株を用いてKIRの機能解析実験を進めた。ヒトリンパ球と腫瘍細胞（K562）の共培養系においてフローサイトメトリーでNK細胞活性、すなわちCD107aの脱顆粒やIFN-gammaの産生を検出する実験系は確立済みで、本実験系でNK細胞活性がNK細胞のKIRアレルと腫瘍細胞のHLAアレルの組み合わせと相関するか、解析した。HLA欠失細胞株や特定のHLAを遺伝子導入・ノックダウンした株、チロシンキナーゼ阻害剤に耐性を持つ株を用いて、多角的解析を行った。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

KIRアレルのタイピング法の確立に向けてはプライマー設計の段階に入っており、2020年度中には精度検証を含めて完成する見込みである。
ATLのレジストリ保存検体を用いた臨床研究は既に倫理承認を得ており、現在は検体委譲の詳細な手続きを進めている。
KIRアレルの機能解析実験は予定より早く進行し、アレル依存性のNK細胞活性調節を確信するに至っている。

今後の研究の推進方策

KIRアレルタイピング法の確立に向けて、プライマー設計と並行してアレルの判定アルゴリズムの開発も行う。本法により、タイピングの曖昧さ（ambiguity）が解消されるはずである。
タイピング法が完成次第、本邦のATL保存検体を用いた臨床研究を行い、移植予後と相関するKIRアレルとHLAの組み合わせを抽出する。本結果は移植免疫におけるKIRアレルの臨床的意義を明らかにするもので、将来的には前向き検証を経て移植医療のガイドライン反映を目指す。
KIRアレルの機能解析結果に基づき、特定のKIRアレルを標的とした創薬による免疫調節の可能性を検証する。

研究成果

• [雑誌論文] Drug monitoring for mycophenolic acid in graft-versus-host disease prophylaxis in cord blood transplantation. (2020)
  • 著者名/発表者名: Muranushi H, Kanda J, Arai Y, Shindo T, Hishizawa M, Yamamoto T, Kondo T, Yamashita K, Matsubara K, Takaori-Kondo A
  • 雑誌名: Br J Clin Pharmacol 巻: - ページ: -
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reconstitution of NK cells expressing KIR3DL1 is associated with reduced NK cell activity and relapse of CML after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. (2020)
  • 著者名/発表者名: Ureshino H, Shindo T*, Sano H, Kubota Y, Ando T, Kidoguchi K, Kusaba K, Itamura H, Kojima H, Kusunoki Y, Miyazaki Y, Kojima K, Tanaka H, Saji H, Oshima K, Kimura S
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 111 ページ: 733-738
  • DOI: 10.1007/s12185-019-02809-5
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hepatitis-associated aplastic anemia with rapid progression of liver fibrosis due to repeated hepatitis. (2020)
  • 著者名/発表者名: Sawada K, Takai A, Yamada T, Araki O, Yamauchi Y, Eso Y, Takahashi K, Shindo T, Sakurai T, Ueda Y, Seno H
  • 雑誌名: Intern Med 巻: 59 ページ: 1035-1040
  • DOI: 10.2169/internalmedicine.4072-19
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphorylated ERK1/2 in CD4 T cells is associated with acute GVHD in allogeneic hematopoietic stem cell transplantation. (2020)
  • 著者名/発表者名: Itamura H, Shindo T*, Yoshioka S, Ishikawa T, Kimura S
  • 雑誌名: Blood Adv 巻: 4 ページ: 667-671
  • DOI: 10.1182/bloodadvances.2019000343
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Clinical impact of the CONUT score in patients with multiple myeloma. (2020)
  • 著者名/発表者名: Okamoto S, Ureshino H, Kidoguchi K, Kusaba K, Kizuka-Sano H, Sano H, Nishioka A, Yamaguchi K, Kamachi K, Itamura H, Yoshimura M, Yokoo M, Shindo T, Kubota Y, Ando T, Kojima K, Kawaguchi A, Sueoka E, Kimura S
  • 雑誌名: Ann Hematol 巻: 99 ページ: 113-119
  • DOI: 10.1007/s00277-019-03844-2
  • 査読あり
• [雑誌論文] Role of cancer immunology in chronic myelogenous leukemia. (2020)
  • 著者名/発表者名: Ureshino H, Shindo T, Kimura S
  • 雑誌名: Leuk Res 巻: 88 ページ: 196273
  • DOI: 10.1016/j.leukres.2019.106273
  • 査読あり
• [雑誌論文] Trametinib attenuates delayed rejection and preserves thymic function in rat lung transplantation. (2019)
  • 著者名/発表者名: Takahagi A, Shindo T*, Chen-Yoshikawa TF, Yoshizawa A, Gochi F, Miyamoto E, Saito M, Tanaka S, Motoyama H, Aoyama A, Takaori-Kondo A, Date H
  • 雑誌名: Am J Respir Cell Mol Biol 巻: 61 ページ: 355-366
  • DOI: 10.1165/rcmb.2018-0188OC
  • 査読あり
• [雑誌論文] Epstein-Barr virus-related diffuse large B cell lymphoma in mogamulizumab-treated adult T cell leukemia with incomplete T cell reconstitution. (2019)
  • 著者名/発表者名: Kamachi K, Shindo T*, Miyahara M, Kitaura K, Akashi M, Shin-I T, Suzuki R, Ohshima K, Kimura S
  • 雑誌名: Int J Hematol 巻: 109 ページ: 221-227
  • DOI: 10.1007/s12185-018-2552-x
  • 査読あり
• [雑誌論文] Clinical impact of the CONUT score and mogamulizumab in adult T cell leukemia/kymphoma. (2019)
  • 著者名/発表者名: Ureshino H, Kusaba K, Kidoguchi K, Sano H, Nishioka A, Itamura H, Yoshimura M, Yokoo M, Shindo T, Kubota Y, Ando T, Kojima K, Sueoka E, Kimura S
  • 雑誌名: Ann Hematol 巻: 98 ページ: 465-471
  • DOI: 10.1007/s00277-018-3502-7
  • 査読あり
• [学会発表] The MEK Inhibitor Trametinib Enhances Diverse T Cell Reconstitution with Suppressing Xenogeneic Graft-Versus-Host-Disease (2019)
  • 著者名/発表者名: Hidekazu Itamura, Hiroyuki Muranushi, Takero Shindo, Kazutaka Kitaura, Seiji Okada, Tadasu Shin-I, Ryuji Suzuki, Akifumi Takaori-Kondo, Shinya Kimura
  • 学会等名: The 62nd Annual Meeting of the American Society of Hematology
  • 国際学会
• [学会発表] Graft-Versus-Host Disease-Free, Relapse-Free Survival in Allogeneic Stem Cell Transplantation for Adult T-Cell Leukemia/Lymphoma Provides a Novel Donor Selection Paradigm (2019)
  • 著者名/発表者名: Hiroyuki Muranushi, Takero Shindo, Masakatsu Hishizawa, Masahito Tokunaga, Atsushi Wake, Nobuaki Nakano, Tetsuya Eto, Michihiro Hidaka, Ilseung Choi, Toshihiro Miyamoto, Naoyuki Uchida, Yukiyoshi Moriuchi, Yasuhiko Miyazaki, Takahiro Fukuda, Tatsuo Ichinohe, Yoshiko Atsuta, Koji Kato
  • 学会等名: The 62nd Annual Meeting of the American Society of Hematology
  • 国際学会
• [学会発表] Allelic polymorphisms of KIRs and HLAs predict favorable responses to tyrosine kinase inhibitors in CML (2019)
  • 著者名/発表者名: Takero Shindo, Hiroshi Ureshino, Shinya Kimura
  • 学会等名: The 78th Annual Meeting of the Japanese Cancer Association
  • 招待講演
• [学会発表] MEK inhibitor trametinib enhances diverse T cell reconstitution with suppressing xenogeneic GVHD (2019)
  • 著者名/発表者名: Hiroyuki Muranushi, Hidekazu Itamura, Takero Shindo, Kazutaka Kitaura, Seiji Okada, Tadasu Shin-I, Ryuji Suzuki, Akifumi Takaori-Kondo, Shinya Kimura
  • 学会等名: The 81st Annual Meeting of the Japanese Society of Hematology
• [学会発表] Mogamulizumb投与後にもT細胞再構築が得られずEBV関連中枢神経原発B細胞リンパ腫を発症したATL (2019)
  • 著者名/発表者名: 蒲池和晴、進藤岳郎、宮原正晴、北浦一孝、明石道昭、新井理、鈴木隆二、大島孝一、木村晋也
  • 学会等名: 第6回日本HTLV-1学会
• [備考] 京都大学大学院医学研究科 血液・腫瘍内科学講座 移植免疫研究室
  • URL: https://www.kuhp.kyoto-u.ac.jp/~hemonc/research/transplantation.html
• [産業財産権] 造血幹細胞移植後の合併症リスクの検出方法 (2020)
  • 発明者名: 岡村浩史、中前博久、進藤岳郎、大塚泰史
  • 権利者名: 大阪市立大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2020-15285
• [産業財産権] 免疫再構築促進剤、及び移植片対宿主病（GVHD）治療剤 (2019)
  • 発明者名: 進藤岳郎、板村英和、村主啓行
  • 権利者名: 京都大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2019-157710
• [産業財産権] 慢性移植肺機能不全の改善又は予防薬 (2019)
  • 発明者名: 進藤岳郎、芳川豊史、高萩亮宏、伊達洋至
  • 権利者名: 京都大学
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: WO2019/159731
  • 外国