| 研究課題/領域番号 |
19K08870
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| 研究機関 | 鹿児島大学 |
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研究代表者 |
鈴木 紳介 鹿児島大学, 鹿児島大学病院, 特例講師 (20437974)
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| 研究分担者 |
上野 真一 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 特任教授 (40322317)
石塚 賢治 鹿児島大学, 医歯学域医学系, 教授 (10441742)
魚住 公治 独立行政法人国立病院機構鹿児島医療センター(臨床研究部), 内科, 医師 (90253864)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2025-03-31
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| キーワード | HTLV-1 / HBZ / CRISPR/Cas9 / アデノウイルスベクター |
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| 研究実績の概要 |
ヒト T 細胞白血病ウイルス I 型 (Human T cell leukemia virus type I: HTLV-1) 由来の遺伝子を標的にし、体内ゲノム編集を利用した新規抗ウイルス療法の 確立を目的とする。すべての HTLV-1 感染細胞で、3’側プロウイルスである、HTLV-1 bZIP factor (HBZ) 遺伝子は保存されいる。clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) /CRISPR-associated 9 (Cas9)システムは、感染細胞のゲノムに組込まれ、発現し続けるHBZ遺伝子を極めて 効率的に機能失活させうるゲノム編集ツールである。2019年度、我々はHTLV-1感染細胞を標的にし、アデノウイルスベクターを高効率で導入できることを報告した (Suzuki S et al. BMC Cancer. 2019)。
HBZ の触媒領域を標的にした2つのCRISPR/Cas9 gRNAsを作成した。HTLV-1感染T細胞株と低悪性度ATL患者白血病細胞を用いて、HBZを標的にしたCRISPR/Cas9 gRNAsを導入し、HBZ の触媒領域の挿入・欠失変異と変異効率を解析中である。更に、効率を高めるために、HBZを標的にしたCRISPR/Cas9 gRNAsを導入した、CMVプロモーター依存性アデノウイルスベクターも作成中である。
感染細胞のゲノムに組込まれ、発現し続けるHBZ遺伝子をCRISPR/Cas9 ゲノム編集ツールを用いて、極めて効率的に機能失活させることが、発がんウイルスへの 抗ウイルス療法の確立に重要と考えている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
COVID19のパンデミック影響と母乳制限の成功による発症頻度低下から、低悪性度ATL患者白血病細胞の検体収集が滞っている。
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| 今後の研究の推進方策 |
HTLV-1感染T細胞株で代用し研究を推進しているが、細胞株は培養の過程で、多数の遺伝子変異が蓄積しており、HBZ 遺伝子への依存度は低下していることも予想される。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
COVID19のパンデミック影響もあり、低悪性度ATL患者白血病細胞の検体収集が滞っているため、現在までの進捗状況に遅れが生じている。また学会での発表機会 も減少している。今後も患者検体の収集は困難なことが予想されるのでHTLV-1感染T細胞株で代用し研究を推進する際の消耗品・試薬の購入に用いる。また外部 検査会社への委託注文も利用する。
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