研究課題
全身性エリテマトーデス（SLE）における自己抗体の病的役割は今のところ不明である．一方，自己抗体である抗TRIM21抗体が細胞内のTRIM21蛋白が有するI型インターフェロン産生抑制作用を阻害することを示唆する結果が先行研究によって示された．そこで本研究では抗TRIM21抗体の細胞内に取り込まれる至適条件，細胞内のTRIM21蛋白との相互作用，およびTRIM21の機能への影響を調べることによって，SLEにおける抗TRIM21抗体の病的意義を解析することを目的としている．また，TRIM21が細胞内で様々な自己抗体のクリアランスを促進するかどうかを調べ，TRIM21蛋白の治療標的としての可能性を検討する．初年度は，抗TRIM21抗体が細胞に取り込まれる至適条件の検討に着手した．予備実験として，ヒト単球由来細胞株THP-1細胞に蛍光色素で標識したウサギIgGと各種TLRリガンドを加えて培養し，蛍光免疫染色法を行った．その結果，細胞質内にIgGの蛍光シグナルが観察され，TLR刺激下でIgGが細胞質内に取り込まれることが分かった．その後，ヒトIgGと各種TLRリガンドを加えて培養し，蛍光免疫染色法を行った．その結果，細胞質内に蛍光シグナルが観察され，やはりTLR刺激下で動物種によらずIgGが細胞内に取り込まれることを確認した．培養する細胞密度やIgGの濃度，蛍光免疫染色の際の固定や膜透過性亢進処理などの条件検討により，細胞のIgG取り込みの至適条件を検討し，本研究における主要な実験系を確立した．
2: おおむね順調に進展している
初年度は本研究に必要な実験系の確立を目標としているが，その目標が達成できている．
次年度は確立した実験系をもとに，抗TRIM21抗体を用いて抗体が細胞内に取り込まれるかどうかを検討するとともに，細胞内における抗TRIM21抗体とTRIM21分子との会合や抗TRIM21抗体によるTRIM21のE3ユビキチンリガーゼ活性への影響を調べる予定である．
注文していたいくつかの試薬の納入が遅くなり，当該年度内に間に合わなかったためである．次年度に計上することとする．
すべて 2020 2019
すべて 雑誌論文 (2件) (うち国際共著 1件、 査読あり 2件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (9件) (うち国際学会 2件)
Frontiers in Immunology
巻: 11 ページ: 98
10.3389/fimmu.2020.00098
Modern Rheumatology
巻: 18 ページ: 1～6
10.1080/14397595.2019.1661584
