| 研究課題/領域番号 |
19K09083
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| 研究種目 |
基盤研究(C)
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| 配分区分 | 基金 |
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| 応募区分 | 一般 |
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| 審査区分 |
小区分55010:外科学一般および小児外科学関連
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| 研究機関 | 順天堂大学 |
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研究代表者 |
古賀 寛之 順天堂大学, 大学院医学研究科, 先任准教授 (30468574)
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| 研究分担者 |
山高 篤行 順天堂大学, 医学部, 教授 (40200703)
松本 有加 順天堂大学, 医学部, 助教 (50813672)
中村 哲也 順天堂大学, 大学院医学研究科, 特任教授 (70265809)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | ヒト腸上皮オルガノイド / 新生児腸疾患 / 腸再生医療 / defined medium |
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| 研究成果の概要 |
本研究では、手術によって切除されたヒト新生児・乳児の小腸検体から腸上皮細胞を単離するプロトコールを確立した。本技術を用いて単離した腸上皮細胞をオルガノイドとして体外培養する条件の検証を行った。その結果、血清を含まず、幹細胞維持に重要なWnt 3aとRspondin-1の濃度が明らかなdefined mediumを用いてオルガノイドを培養し、増幅可能であることを見出した。この条件において、オルガノイドは幹細胞と全ての分化細胞を含むことを確認した。また、切除直後の腸組織を処理したのち、簡易な方法で2日間保存した検体からでも、腸上皮細胞を単離しオルガノイドとして培養を樹立できることを示した。
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| 自由記述の分野 |
小児外科
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| 研究成果の学術的意義や社会的意義 |
既知濃度因子のみを含む無血清培地を用いた培養方法は、オルガノイドを用いた実験の再現性を向上する。また添加因子濃度のカスタマイズが可能であることから細胞分化・増殖などの細胞挙動を開発する研究を可能とする点で学術的意義を持つ。本研究で確立した検体処理・保存方法を用いることで、手術施設で切除した腸組織を別の研究施設に移送してオルガノイドを作製し研究に利用することができる。本研究成果は、新生児・乳児の腸上皮成機構の解明や新生児・乳児期の腸疾患の病態研究の礎の技術になると考える。
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