| 研究実績の概要 |
胸腺上皮細胞より発生する胸腺上皮性腫瘍（TET）は進行例では難治であり、近年免疫チェックポイント阻害剤（ICI）の臨床応用が期待されている。しかし胸腺上皮細胞は胸腺において自己を攻撃するT細胞を排除する中枢免疫寛容を司るため、胸腺上皮細胞より発生するTETについては、その免疫逃避機構が他の固形癌と全く異なる可能性がある。本研究の目的はTETの独特な免疫逃避機構を解明し、ICIの効果予測、有効な使用法を解明することである。
研究に先立ち当科に保存しているヒト肺癌検体を用いて、免疫染色による腫瘍および浸潤リンパ球(TIL)の解析を行った。腫瘍およびその周囲組織のTILにおけるPDL-1, PD-1, CD4, CD8, FOXP3, MHCのタンパク発現を免疫組織化学染色にて調べ、PDL-1陽性細胞率とTILの特徴を検証した。この結果を踏まえ、既に当科に保存しているヒト胸腺上皮性腫瘍、正常胸腺を用いて、免疫染色による腫瘍および浸潤リンパ球(TIL)の解析を行っている。
フローサイトメトリー（FACS）を用いたTILの解析のために、手術で切除した新鮮検体から正常胸腺、腫瘍部を別々に細断し、dissociatorにより細胞を単離する技術を開発した。現在までに6例の新鮮検体ストックの保存に成功した。20例程度にストックを増やし、FACSによりPDL-1, PD-1,CD4, CD3, CD8などを解析する予定である。更に制御性T細胞（Treg）分画を正常胸腺、腫瘍部ごとに測定、解析し、TETの臨床病理学的因子との関わりを調べる予定である。
|
| 今後の研究の推進方策 |
上記進捗を踏まえ以下の研究を進めていく。
１、免疫染色による腫瘍および浸潤リンパ球(TIL)の解析（保存検体）：腫瘍およびその周囲組織のTILにおけるPDL-1, PD-1, CD4, CD8, FOXP3, MHCのタンパク発現を免疫組織化学染色にて調べる。PDL-1陽性細胞率とTILの特徴を検証する。
２、NGSによる体細胞変異数（TMB）解析（保存凍結検体、血清）：次世代シークエンサー（NGS）を用いたtarget sequenceによりIon AmpliSeq Comprehensive cancer panelの409のtumor suppressor geneおよびoncogeneを解析する。
３、フローサイトメトリー（FACS）を用いたTILの解析（新鮮検体）：手術で切除した新鮮検体から正常胸腺、腫瘍部を別々に細断し、dissociatorにより細胞を単離したのち手術で切除した新鮮検体から正常胸腺、腫瘍部を別々に細断し、dissociatorにより細胞を単離したのちFACSによりPDL-1, PD-1,CD4, CD3, CD8などを解析する
|
