難治性再発卵巣腫瘍を標的とした改変型腫瘍溶解性ウイルスの開発

2020 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 19K09751
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 那波 明宏 名古屋大学, 医学系研究科, 特任教授 (90242859)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2022-03-31
• キーワード: 腫瘍溶解性ウイルス / １型単純ヘルペスウイルス / 卵巣癌 / 抗がん剤 / 腎毒性 / 尿毒素 / インドキシル硫酸 / SLCO2B1

研究実績の概要

卵巣癌患者における5年生存率は長きに渡ってあまり改善が見られず、従来とは異なった治療戦略が求められている。本研究では、卵巣癌細胞を特異的に殺傷する腫瘍溶解性ウイルス（OV）を用いた治療法の開発を目指す。遺伝子改変操作をすることなく様々な分子を標的化できる改良型OVとして、蛍光色素FITCに特異的に結合するOV（FOV）を発案した。卵巣癌の腹膜播種モデルマウスに対して、FOVを利用して様々な腫瘍マーカー分子を標的としたFOV療法を実施し、治療効果を比較解析することで再発卵巣癌の治療に有効な標的分子を同定する。
令和２年度は（１）FOVの作製、及び、（２）新規治療標的の探索の２つを中心的に行った。
（１）FOVの作製には、薬剤耐性カセット等を挿入することなく遺伝子配列を置換することのできる「galK選択法」が必要であり、galK選択法の実施に必要な大腸菌SW102株を米国National Cancer Instituteより取り寄せた。SW102株に、pYEbac102（HSV-1ゲノムが挿入されているBAC DNA）を導入した。
（２）卵巣癌の治療においては化学療法が重要な位置を占めるが、近年、化学療法によって癌の転移が促進されることが明らかになりつつある。このことについて、第一選択薬であるプラチナ製剤には腎毒性があり、癌患者においては急性腎機能障害が観察されることに着目して検討を行った。すなわち、腎機能障害によって血中に蓄積する尿毒素の一種であるインドキシル硫酸（IS）が卵巣癌細胞に取り込まれることで細胞内活性酸素種の産生を惹起し、転移関連遺伝子の制御異常を介して細胞遊走や浸潤を促進することを明らかにした上で、卵巣癌細胞におけるISトランスポーターとしてSLCO2B1を同定した。抗癌剤治療の際にSLCO2B1の機能を抑制することで、化学療法による転移を抑制できる可能性がある。

現在までの達成度 (区分)

3: やや遅れている

理由

SW102株の譲渡を申し込んですぐにNational Cancer InstituteのあるワシントンD.C.がロックダウンしてしまい、発送が１年近く遅れた為。

今後の研究の推進方策

材料であるBAC DNA及び大腸菌SW102株を入手できたので、（１）のFOV作製を最優先とする。
（２）のテーマについては動物実験を残すのみとなったので、今年度内の論文発表を目指す。

次年度使用額が生じた理由

共通機器使用料や実験動物飼育料などの請求は翌月になってから発生する為、支払いのために残した。

研究成果

• [雑誌論文] Ovarian Cancer-Associated Mesothelial Cells: Transdifferentiation to Minions of Cancer and Orchestrate Developing Peritoneal Dissemination (2021)
  • 著者名/発表者名: Mogi Kazumasa、Yoshihara Masato、Iyoshi Shohei、Kitami Kazuhisa、Uno Kaname、Tano Sho、Koya Yoshihiro、Sugiyama Mai、Yamakita Yoshihiko、Nawa Akihiro、Tomita Hiroyuki、Kajiyama Hiroaki
  • 雑誌名: Cancers 巻: 13 ページ: 1352～1352
  • DOI: 10.3390/cancers13061352
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Ovarian cancer-associated mesothelial cells induce acquiredplatinum-resistance in peritoneal metastasis via the FN1/Akt signaling pathway (2020)
  • 著者名/発表者名: Masato Yoshihara, Hiroaki Kajiyama, Akira Yokoi, Mai Sugiyama, Yoshihiro Koya, Yoshihiko Yamakita, Wenting Liu, Kae Nakamura, Yoshinori Moriyama, Hiroaki Yasui, Shiro Suzuki, Yusuke Yamamoto, Carmela Ricciardelli, Akihiro Nawa, Kiyosumi Shibata, Fumitaka Kikkawa
  • 雑誌名: International Journal of Cancer 巻: 146 ページ: 2268-2280
  • DOI: 10.1002/ijc.32854
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Filopodia play an important role in the trans-mesothelial migration of ovarian cancer cells (2020)
  • 著者名/発表者名: Masato Yoshihara, Yoshihiko Yamakita, Hiroaki Kajiyama, Takeshi Sengae,Yoshihiro Koya, Mamoru Yamashita, Akihiro Nawa, Fumitaka Kikkawa
  • 雑誌名: Experimental Cell Research 巻: 392 ページ: -
  • DOI: 10.1016/j.yexcr.2020.112011
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Folate-appended cyclodextrin carrier targets ovarian cancer cells expressing the proton-coupled folate transporter (2020)
  • 著者名/発表者名: Shinichi Saito, Yoshihiro Koya, Hiroaki Kajiyama, Mamoru Yamashita, Fumitaka Kikkawa, Akihiro Nawa
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: 111 ページ: -
  • DOI: 10.1111/cas.14379
  • 査読あり / オープンアクセス