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本研究では、CNPによる効率的な卵胞発育誘導法を開発し、高齢不妊女性の新規不妊治療法の創出を目指す。これまで以下のことを明らかにしてきた。①48-50週齢の高齢マウスにCNPまたはFSHを腹腔内投与し、2日後にhCGを投与して排卵させ、卵管内の排卵卵子数を計測して比較し、同時に卵巣を採取し、組織学的に排卵卵胞数および各発育段階の卵胞の割合を調べ、CNPの至適投与量を決定した。②高齢マウスでは、FSHに対する反応性が低下し、CNPのみでは卵胞発育誘導効果が弱く、予備試験で得られた、CNPが高齢マウスの顆粒膜細胞のFSH受容体の発現を増加させる知見を応用し、CNPを前投与してFSH受容体の発現を高めた後FSHを投与したところ、排卵卵子数の増加を認めた。さらに、CNPによる高齢マウスの卵胞発育誘導にSrc-STAT経路が関与していることを示した。また、CNPは高齢マウスの顆粒膜細胞のLH受容体の制御を行うことで、高齢マウス卵胞でおこりやすい早期黄体化を防止する作用があることを明らかにした。③CNPによる卵胞発育誘導法のヒトへの有効性を検証する基礎試験として、高齢マウスへのCNP投与による卵胞発育誘導の妊娠に対する安全性の確認を行った。高齢マウスの卵胞発育誘導のために至適化したプロトコールに従ってCNPを投与し、体重異常、外表・形態異常、行動異常の有無を確認したが、特に異常を認めず、また、主要臓器を摘出して組織標本とし、組織変化を調べたが、特に変化は認めなかった。さらに、CNP投与群、非投与群のマウス由来の卵子を用いて体外受精・胚培養を行い、受精率、胚盤胞到達率を調べたが、CNP非投与群との間に有意な差はなかった。その後、胚盤胞を偽妊娠マウスの子宮に移植し、体外受精19日目に帝王切開して着床率、流産率、産仔獲得率を比較したが、こちらも有意な差を認めなかった。④ヒト非黄体化顆粒膜細胞株において、CNPは細胞増殖、エストロゲン産生、cGMP産生を亢進した。
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