| 研究課題/領域番号 |
19K09984
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| 研究機関 | 国立研究開発法人理化学研究所 |
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研究代表者 |
前田 亜希子 国立研究開発法人理化学研究所, 生命機能科学研究センター, 上級研究員 (40776423)
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| 研究分担者 |
大西 暁士 国立研究開発法人理化学研究所, 生命機能科学研究センター, 上級研究員 (70569102)
万代 道子 国立研究開発法人理化学研究所, 生命機能科学研究センター, 副プロジェクトリーダー (80263086)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | 網膜色素変性症 / iPS細胞 / 薬物治療 |
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| 研究実績の概要 |
（１）ハイスループットスクリーニングを行う。（研究分担者1）1. リードスルー効果を判定するため、ルシフェラーゼを用いたレポーターアッセイシステムを構築した。システムにはHEK293細胞を用い、網膜色素変性原因遺伝子変異であるRP2-R120*変異をテストモデルとしてルシフェラーゼレポーター遺伝子とともに導入した。コントロールとしてRP２正常配列とルシフェラーゼ遺伝子を導入した。また遺伝子非依存性を検討するためにペリフェリンR64*変異をルシフェラーゼ遺伝子を、コントロールとしてRP２正常配列とルシフェラーゼ遺伝子を導入した。それぞれ複数細胞クローンを樹立した。2. レポーターアッセイシステムと既存薬ライブラリー（spectral collection）を用いた化合物ハイスループットスクリーニングを行った。スクリーニングにて20超える候補薬が選出され、このうち治験に進んでいるPTC薬よりも高いルシフェラーゼ活性を持つものを10候補薬までに絞り込みを行った。2候補薬に対して容量依存性の検討を行った。
（２）ヒト疾患モデルの確立と候補薬の評価（研究分担者2）1. RP患者の遺伝子診断を行い、PTC変異を持つRP患者、RP2-R120*変異患者とペリフェリンR64*変異患者からiPS細胞を樹立し、細胞培養と研究に必要な細胞ストックを行った。2. PTC変異を持つ患者iPS細胞から立体網膜と網膜色素上皮細胞を分化誘導中である。
（３）マウスモデルの確立と候補薬の評価（研究分担者3）1. RPマウスラインを樹立中である。トランスジェニック用のベクターコンストラクトの構築は終了している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
各々の分担者は計画通りに研究を遂行できている。
研究途中のトラブルシューティングにも適切に対応できている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後も計画通りに研究を進めていく。
分担者１は、スクリーニングにて得た化合物の容量依存性を中心に検討する。
分担者２は、患者から得たiPS細胞の網膜細胞への分化を継続し、網膜細胞としての検証を行う。
分担者３は、マウスモデル確立に向けた作業を継続する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
残金8883円は次年度の消耗品の購入に使用する。
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