| 研究課題/領域番号 |
19K09987
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
吉田 武史 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, ジョイントリサーチ講座准教授 (30451941)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | 視覚アレスチン / 近視 / 網膜色素上非 / 視細胞 |
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| 研究実績の概要 |
近視の本態は眼軸延長であり、過去の研究から網膜内に近視発症の最初のトリガーがあるとされているものの原因分子は確定されていない。 当研究者は光受容器である網膜視細胞と網膜色素上皮(RPE)との間に存在する視覚サイクルカスケードに関与する分子である視覚アレスチン(Arr1)が眼軸延長に関わると推察して研究を進めている。
初年度の研究実績として視覚アレスチン発現の機能解析でRPE 細胞に Arr1 が取り込まれる機序の確立を行い、さらにマウスとラットに光刺激を与えると、網膜の視細胞にdominantに発現するはずの視覚アレスチンが網膜色素上皮(RPE)に貪食作用により取り込まれることを解明した。光刺激を与えない場合にはRPEへのArr1取り込みは 認められなかったことから、光刺激はArr1の網膜内局在に大きく関わっていることが明らかになった。2年度の研究実績として、まずArr1遺伝子を組み込んだAAVを作成した。このウィルスをマウス硝子体内にウィルス力価ごとに投与を行い、投与から２週目、４週目にマウス網膜内におけるウィルス力価に応じてAAVの発現を網膜サンプルをAAVに組み込んだGFPタンパクの免疫染色することで確認した。同時にArr1タンパク発現についても著名な増強が見られた。また、コントロールとしてPBSを硝子体内投与をおこなった網膜サンプルと比較して構造上の異常は現在まで認められていない。
今年度は作成したArr1遺伝子を組み込んだAAVが硝子体注射によってマウス網膜内に発現し、構造上異常を認めていないことを確認できたことから、さらに眼瞼縫合を用いた視覚遮蔽による近視誘導を行う際にArr1の強制発現が近視誘導に抑制的に働くかを現在確認中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
ここまで、問題もなく順調に研究が進んでいる。
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| 今後の研究の推進方策 |
2年度の研究成果としてはほぼ達成しており順調である。 最終年度は、視覚アレスチンを取り込んだマウス網膜色素上皮細胞内での遺伝子変化をさらに詳細に解析する。マウスに視覚遮蔽で近視誘導を行った上で作成した視覚アレスチンを強制発現ウィルスを硝子体もしくは網 膜下への投与を用い、近視発症の鍵である眼軸延長にどのように影響するか超音波エコーを用いて眼軸を測定し評価する。今年度は近視発症のメカニズムとの関わりを解明し、近視抑制治療の開発に向けた土台を構築する。 この研究が遂行され仮説が再現できれば、世界で初めて近視発生の病態の解明となり社会的インパクトが強いだけでなく、近視治療の分子ターゲットが同定さ れることにより治療開発に拍車がかかるものと考えられる。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究は概ね順調であるが、動物実験において多匹での研究実施開始にスケジュール変更があったために、予算執行にズレが生じた。予定してあった動物実験はすでに調整済みで開始できる状況にあり、最終的な研究スケジュールには影響を及ぼさないと考えられる。
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