| 研究課題/領域番号 |
19K10147
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| 研究機関 | 新潟大学 |
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研究代表者 |
大倉 直人 新潟大学, 医歯学総合病院, 助教 (00547573)
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| 研究分担者 |
吉羽 永子 新潟大学, 医歯学総合病院, 講師 (10323974)
吉羽 邦彦 新潟大学, 医歯学系, 教授 (30220718)
柿原 嘉人 新潟大学, 医歯学系, 助教 (40379938)
大島 勇人 新潟大学, 医歯学系, 教授 (70251824)
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| 研究期間 (年度) |
2022-01-04 – 2025-03-31
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| キーワード | SVCT2 / GLUT1 / アスコルビン酸 / 歯髄再生療法 |
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| 研究実績の概要 |
Svct2 やGlut1 と呼ばれる輸送担体によってアスコルビン酸は細胞内を輸送することができる。
初年度は、 MTA直覆による歯髄創傷治癒モデルラットを用いて、歯髄創傷時に展開されるアスコルビン輸送経路についてSvct2とGlut1に着目した免疫組織学的解析とリアルタイムPCR解析による遺伝子学的解析を時空間的に行った。 その結果、正常歯髄での酵素抗体法による免疫染色反応では象牙芽細胞、血管内皮細胞、歯根膜細胞および神経線維の一部においてSvct2/Glut1の陽性反応を 認めた。創傷治癒過程では、覆髄後1日の歯髄細胞では Svct2/Glut1 陽性細胞ともに認められなかったが、MTA 覆髄 3日後で象牙芽細胞を含めた多くの歯髄 組織内の細胞にSvct2/Glut1 陽性反応を認め、5 日後では被蓋硬組織が形成されはじめた覆髄部直下で Svct2/Glut1 陽性の象牙芽細胞様細胞が確認された。7日後では、被蓋硬 組織に沿って円柱状に配列した Svct2/Glut1 陽性の象牙芽細胞様細胞が認められた。覆髄後における Slc23a2 および Slc2a1 ともにmRNA 発現量は未処置歯群と比較して3日後をピークに有意に増加した(P<.01)。MTA 覆髄3-5日後にSvct2 と Glut1 による創傷部位へのアスコルビン酸供給経路と代謝経路が形成されていたことが示唆された。さらに歯髄創傷治癒時におけるアスコルビン酸の役割が、象牙芽細胞様細胞への分化においても重要な因子である可能性が考えられた。
2年目にはこれらの結果が正しいかどうかの再試を行いつつ、マクロファージによる創傷治癒の働きについても検討した。すなわち、創傷時に機能するM2マクロファージの局在について特異的抗体を用いて解析したところ、アスコルビン酸を生体内から排除したラットでは、M2マクロファージの局在が創傷面直下で減少することが明らかとなった。したがって、アスコルビン酸がM2マクロファージの機能について深く関与していることが示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
当初の予定とほぼ同じように、アスコルビン酸における歯髄創傷治癒時の詳細な役割や機能が解明されつつある。
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| 今後の研究の推進方策 |
さらに詳細な分子メカニズムについて、特異的抗体を用いた免疫組織学的解析や特異的プライマーを用いた遺伝学的手法を元に解析を進めていく予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
当初の予定では、追試実験の際に、不足しそうな高額抗体試薬を予め購入することで、研究を加速度的に進めていく予定であった。しかし、実際には、残存していた抗体で追試が滞りなく終わることが出来たため、当該助成金が生じた結果となった。
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