| 研究課題/領域番号 |
19K10152
|
|---|
| 研究機関 | 九州大学 |
|---|
研究代表者 |
岩下 未咲 九州大学, 歯学研究院, 助教 (80611326)
|
|---|
| 研究分担者 |
浅野 知一郎 広島大学, 医系科学研究科(医), 教授 (70242063)
西村 英紀 九州大学, 歯学研究院, 教授 (80208222)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
|
| キーワード | Xaf1 / マクロファージ / インターフェロンβ |
|---|
| 研究実績の概要 |
2型糖尿病の発症・進展には膵β細胞の機能障害が重要な因子であることが明らかになっている。膵β細胞機能障害に対する治療戦略として、膵β細胞のインスリン分泌能増大および膵β細胞量増大の両面へのアプローチが有用である。
先行研究において、活性化マクロファージ由来インターフェロンβ（IFNβ）が膵β細胞におけるX-linked inhibitor of apoptosis (XIAP) associated factor 1（Xaf1）の発現亢進を介して膵β細胞のアポトーシスを誘導することを見出した。
本研究では、膵β細胞Xaf1が糖尿病発症に及ぼす影響を検証する。
パルミチン酸で刺激したRAW264.7マクロファージ細胞株では、IFNβ遺伝子発現が有意に亢進した。野生型マウスから単離した膵島をIFNβで刺激すると、Xaf1発現が増大した。高脂肪食を8週間負荷したマウスでは、通常食負荷に比べ、膵臓組織におけるXaf1タンパク質発現の増大をみとめた。以上から、肥満によりXaf1発現が誘導される可能性が示唆された。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
実験に使用予定のマウスの作製に時間を要していることから、計画より遅れている。現在は細胞および、購入可能なマウスを用いた検証を実施している。
|
| 今後の研究の推進方策 |
使用予定のマウスの作製が大幅に遅れる場合、その間はvitroでの実験を中心に膵β細胞Xaf1が糖尿病発症に及ぼす影響を検証する。
【マウスプライマリ膵β細胞における検証】
野生型および、遺伝的肥満糖尿病モデルdb/dbマウス、高脂肪食誘導肥満マウスの膵臓から膵島を摘出、膵β細胞を単離し、IFNβ刺激時のXaf1発現についてウェスタンブロットにて解析する。次に各マウスの膵β細胞においてsiRNAによりXaf1をノックダウンした場合のグルコース応答性のインスリン分泌（インスリン分泌量、インスリン含量、インスリン分泌率）および、グルコーストランスポーター（GLUT）2 やグルコキナーゼなどグルコースの取込みや利用に関わる遺伝子群、膵β細胞マーカー遺伝子MafA、Pdx1のmRNA発現について解析する。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
マウスを用いた実験の実施が遅れているため、次年度使用額が生じた。
今年度のin vitroおよびin vivoでの検証から、肥満によるXaf1発現誘導が示されたため、今後マウスにおいて高脂肪食を負荷し検証する。次年度以降は、下記計画に沿って遂行する。
①マウスプライマリ膵β細胞における検証：野生型、遺伝的肥満糖尿病モデルdb/dbマウス、高脂肪食誘導肥満マウスの膵臓から単離した膵島を用いてXaf1発現とインスリン分泌能について比較検証する。さらに、グルコースの取込みや利用に関わる遺伝子群、膵β細胞マーカー遺伝子の発現との関連について解析する。②膵β細胞特異的Xaf1欠損マウス（Xaf1 KO）を用いた検証：Xaf1 KOマウスおよび、野生型マウスに高脂肪食を負荷し、インスリン感受性および耐糖能、インスリン抵抗性、膵島構成細胞、膵β細胞機能に及ぼす影響について比較検証する。
|
