| 研究課題/領域番号 |
19K10191
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| 研究機関 | 日本歯科大学 |
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研究代表者 |
筒井 健夫 日本歯科大学, 生命歯学部, 教授 (70366764)
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| 研究分担者 |
小林 朋子 日本歯科大学, 生命歯学部, 講師 (10548283)
田口 光正 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構, 高崎量子応用研究所 先端機能材料研究部, 上席研究員 (60343943)
大山 智子 国立研究開発法人量子科学技術研究開発機構, 高崎量子応用研究所 先端機能材料研究部, 主幹研究員 (90717646)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 機能性コラーゲン / 歯髄幹細胞 / 分化誘導 |
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| 研究実績の概要 |
当該年度は機能性コラーゲンゲルに歯髄幹細胞を播種し、経時的な遺伝子発現変化について、デジタルPCRを用いて解析を行なった。実験では、コラーゲンゲルを用いていないディシュと強度の異なる機能性コラーゲンゲルで覆われたディシュに歯髄幹細胞を播種し、通常培地と石灰化誘導培地をそれぞれ作用させた。遺伝子発現量について、通常培地と石灰化誘導培地を作用させてから21日目までのサンプルを回収しデジタルPCRを行なった。回収日が10日目の幹細胞マーカーと骨分化マーカー、およびミトコンドリア複合体についての発現解析において、幹細胞マーカーの通常培地と石灰化誘導培地作用群では、最も強度の高いコラーゲンゲルで発現が高く、骨分化マーカーでは石灰化誘導培地作用群において、同様に最も強度の高いコラーゲンゲルで発現が高く解析された。また、ミトコンドリア複合体Vの発現量は、通常培地と石灰化誘導培地作用群を比較した際、最も強度の高いコラーゲンゲルで発現が高く解析された。さらに、他のサンプル回収日についての解析を計画している。また、24wellプレートを用いた、通常培地と硬組織誘導培地を作用させたコラーゲンゲル未使用群と強度の異なる機能性コラーゲンゲル使用群におけるカルシム濃度の測定を進めている。
強度の異なる機能性コラーゲンゲルにおいては、通常培地と石灰化誘導培地を作用させたそれぞれのサンプルにて細胞骨格の構造を観察するため、蛍光顕微鏡を用いたPhalloidin染色を行なっている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
大学において配管工事のために研究室の移設がされたこと、および新型コロナウイルス感染拡大による緊急事態宣言が発出されたことにより、業務に制限が加わり予定通りに研究が進められなかったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
新型コロナウイルス感染拡大予防対策を実施しながら、in vivo実験を進める。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
大学において配管工事のために研究室の移設がされたこと、および新型コロナウイルス感染拡大による緊急事態宣言が発出されたことにより、業務に制限が加わり予定通りに研究が進められなかったため。新型コロナウイルス感染拡大予防対策を実施しながらin vivoにおける実験の遂行、および解析を計画している。
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