| 研究課題/領域番号 |
19K10326
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
北村 哲也 北海道大学, 医学研究院, 客員研究員 (00451451)
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| 研究分担者 |
菊地 奈湖 (間石奈湖) 北海道大学, 歯学研究院, 助教 (00632423)
大廣 洋一 北海道大学, 歯学研究院, 教授 (40301915)
樋田 京子 北海道大学, 歯学研究院, 教授 (40399952)
東野 史裕 北海道大学, 歯学研究院, 准教授 (50301891) [辞退]
松田 彩 北海道大学, 歯学研究院, 助教 (60514312)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | エナメル上皮腫 |
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| 研究実績の概要 |
若年者の顎骨内に生じるエナメル上皮腫は、良性腫瘍にも関わらず浸潤性に増殖し再発することが多いがそれらの機序は不明である。本研究では、エナメル上皮腫の浸潤性増殖と再発の機序を解明することが目的である。
組織学的にエナメル上皮腫を観察すると、腫瘍はbuddingとよばれる出芽様構造を形成して間質に伸長しており、これが浸潤性増殖および再発の原因と考えられている。我々はこれまでにHuRタンパク質と⊿N63タンパク質がbudding領域で高発現していることを免疫組織学的に明らかにしてきた。ヒトエナメル上皮腫細胞であるAM-1 細胞を用いて実験を行ったところ、HuRタンパク質が⊿Np63mRNAに結合・安定化させ、⊿Np63タンパク質の発現を上昇させることを突き止めた。⊿Np63の発現をCRISPR-CAS9によってノックアウトしたAM-1細胞ではE-cadherinの発現が減弱していた。そこでbudding領域ではEMTが起こっていると考え、 vimentin等間葉系マーカーを用いたがこれらの発現は増加しておらず、上皮系タンパク質が減少するincomplete EMTが生じていることが明らかとなった。また、組織学的に観察すると腫瘍周囲の骨には骨吸収に加え、骨添加も認められた。つまり、エナメル上皮腫は浸潤性に増殖し、 高頻度に再発することから悪性腫瘍に類似した動態を示すが、 悪性腫瘍とは以下の点で異なることが明らかとなった
①浸潤した腫瘍の先端部では細胞接着因子の発現低下が起こって細胞同士が形態変化を起こしやすい状態になっているが、EMTは起こっていない。
②伸長した腫瘍先端部周囲では骨の吸収と添加が起こることによって腫瘍が閉じ込められ、これが高頻度に再発しやすい原因と考えられた。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
1: 当初の計画以上に進展している
理由
研究は 計画通り進捗しており概ね順調に進んでいると判断した。これまで良性腫瘍であるエナメル上皮腫がなぜ浸潤性に増殖するのか、また再発しやすいのかは大きな謎であったが、本研究によって明らかとなった。それは、エナメル上皮腫の出芽様構造であるbuddingが重要な役割を果たし、この領域ではHuRタンパク質が⊿Np63を制御し、その下流に存在するE-cadherinの発現が減弱していた。E-cadherinの発現が減弱したことによってbudding領域での細胞接着が減弱して形態変化を容易にしていると考えられた。また、budding周囲の骨添加が再発の鍵になって言うことも明らかとなった。分子生物学的、病理組織学的にエナメル上皮腫の動態の謎が明らかとなったことが、順調に進捗している判断した大きな理由である。
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| 今後の研究の推進方策 |
現在、上記の結果をまとめた論文を執筆しており、現在最終段階に達している。さらに、deltaNp63ノックアウト細胞ではE-cadherinの発現が上昇したがその分子メカニズムは不明であるため、これを解明する。また、EMTに関連してBカテニンの発現を検討したところ、budding領域ではBカテニンの発現が上昇していた。Bカテニンの核内移行はみられず細胞膜および細胞質に局在していた。BカテニンはE-cadherinと結合することが知られているが、budding領域ではE-cadherinが減弱しており、これらの関係性について検討する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
本年度もcovid-19の流行によって少なからず研究活動の縮小を余儀なくされた。そのため物品や試薬の購入、特に旅費が減少し次年度使用額が生じた。
次年度は、上記の研究に加え、これまでの研究をまとめた論文の投稿費や研究に関する意見を伺うための学会参加を予定している。
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