| 研究課題/領域番号 |
19K10342
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| 研究機関 | 北海道医療大学 |
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研究代表者 |
奥村 一彦 北海道医療大学, 歯学部, 教授 (60194510)
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| 研究分担者 |
細川 洋一郎 弘前大学, 保健学研究科, 教授 (70173599)
小林 美智代 奥羽大学, 歯学部, 講師 (80316265)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 癌幹細胞 / スフェロイド形成細胞 / 上皮ー間葉転換 |
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| 研究実績の概要 |
1 ヒト扁平上皮癌細胞株からの癌幹細胞の樹立：ヒト舌原発巣由来扁平上皮癌細胞SASと、この親株から樹立した浸潤性の異なる細胞株SAS-H1(高浸潤性)、SAS―L1(低浸潤性)を用い、EZSHERE SP(スフェロイド形成培養容器)を用いて血清非存在化に培養を行い、基質面に接着しない球形集塊形成(スフェロイド形成)によって癌幹細胞を樹立した。幹細胞表面マーカーであるCD44, CD133がいずれもスフェロイド形成した癌幹細胞に強い発現がみられた。この癌幹細胞のADAR1mRNAとタンパク質発現を検討したところ、SAS-H1(高浸潤性)と親株SASから得られた癌幹細胞は、ADAR1発現が亢進していたが、SAS-L1(低浸潤性)から得られた癌幹細胞は、ADAR1発現に差を認めなかった。
2 癌幹細胞におけるADAR1役割：ADAR阻害薬(EHNA塩酸塩とpentostatin)の処理を行った癌幹細胞は、ADAR阻害剤によって増殖抑制がみられ、細胞遊走と基底膜浸潤能及び基質分解酵素産生能が低下した。
3 癌幹細胞における自己複製能の制御:癌幹細胞におけるADAR1のノック・ダウンによる形質変化の解析を行った結果、癌幹細胞で発現するSOX2とPOU5F1の発現を検討した結果、si-ADAR1導入細胞で、SOX2とPOU5F1発現が低下した。
4 癌幹細胞における上皮ー間葉転換誘導能：樹立した癌幹細胞とその親株にTGF-による上皮ー間葉転換を誘導させた結果、癌幹細胞は親株細胞と比較し、間葉マーカーであるVimentinやN-Cadherin mRNA発現が上昇するとともに、これらを制御する転写因子のSnail、Twist2及びSlugの発現上昇がみられたことから、癌幹細胞が再発転移の制御を担っていることが示唆された。
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