| 研究課題/領域番号 |
19K11468
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| 研究機関 | 東北学院大学 |
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研究代表者 |
坂本 譲 東北学院大学, 教養学部, 教授 (30316434)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | 運動 / アレルギー / 自然リンパ球 / 好塩基球 / Th2免疫応答 / 免疫制御受容体 |
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| 研究実績の概要 |
本研究は運動によるアレルギー予防効果について検討するため、自然免疫に属しアレルギーや炎症応答に関与する自然リンパ球（innate lymphoid cells; ILC）に注目し、運動によるILCの分化や増殖、またサイトカイン産生能などの機能制御とその分子基盤を明らかにすること、さらに運動によるILCを介したアレルギーの制御について検討することを目的とした。本研究では、運動によるILCの分化や増殖、サイトカイン産生などの機能面からの検討と実際のアレルギーモデルマウスを用いて運動による病態発症の変化について検討を行い、運動によるILCを介したアレルギーの予防効果について細胞レベルと個体レベルの両面から明らかにする計画である。計画を遂行するにあたり令和2年度は以下の実験を実施した。
1）前年度に引き続き運動によるILCの分化や機能の制御を検討するため、C57BL/6NJcl野生型およびTh2免疫偏向モデルマウスに対し、回転ケージを用いた長期の自発運動を行わせ、運動の影響を検討した。その結果、両者の体重には変化がなかったものの運動量に差異を確認した。
2）運動がILCs（ILC1、 ILC2、 ILC3）に及ぼす影響の探索として、自発運動実施期間終了後の両群マウスから血清、骨髄、脾臓及び小腸採取後に、骨髄、脾臓及び小腸粘膜固有層に局在する細胞を分離回収し、フローサイトメトリー解析による検討を行った。その結果、骨髄中のILCサブセットに差異が観察された。この結果は運動が骨髄中のリンパ球の発生に影響を及ぼす他者の報告を支持するものであり、また我々の長期運動による骨髄好塩基球の割合の変化を示す結果とも関連性を示すものである。これらの結果から、運動が免疫細胞を介してアレルギー応答に関与する可能性を示唆するものであると考えている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
前年度に実施した条件検討をもとに今年度に実施したマウス運動実験では、予定していた運動期間での実施、マウスの自発運動量のモニタリング、及び予定していたサンプルの回収、およびILC等のフローサイトメトリー解析等が順調に進んだものの、サイトカイン産生に関する検討については、測定準備やサンプル回収は進んでいるものの測定がまだ実施されていないことから。
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| 今後の研究の推進方策 |
運動によるILCの分化や機能の制御への影響を検討するため、Th2免疫偏向モデルマウスでの長期自発運動実施後の骨髄、脾臓及び小腸粘膜固有層に局在するILCの機能変化、特にサイトカイン産生をフローサイトメトリー解析、ELISA解析を行い評価すると共に、変化が観察されたILCサブセットについては運動による遺伝子発現の変化を評価する。
また並行して、運動による免疫機能修飾の候補となる液性因子の網羅的解析として、長期の自発運動実施前後に採取した血清を用いて、血中の抗体価（IgM、 IgG、 IgE）およびサイトカイン産生の変化をフローサイトメトリー解析およびELISA解析にて行う。
さらに、ILCの機能制御に関わる免疫制御受容体の発現探索とシグナル解析のため、ILCに発現する活性化型および抑制型免疫制御受容体、関連制御分子の機能解析を遺伝子発現解析およびフローサイトメトリー解析、タンパク質発現解析等で行い、運動によるILCの機能変化と関与する分子群を検証する計画である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
年度末に進めた物品購入に際して物品の納品が所属機関の年度会計の締切に間に合わず、支払いが次年度の扱いとなったことが理由である。
令和3年度は当初の予定通り、計画している実験に必要な実験動物、試薬、検査キット及びディスポ消耗品等を購入するために使用予定である。
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