| 研究課題/領域番号 |
19K11750
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| 研究機関 | 日本薬科大学 |
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研究代表者 |
井上 裕子 日本薬科大学, 薬学部, 教授 (50367306)
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| 研究分担者 |
松本 直行 鶴見大学, 歯学部, 准教授 (20386080)
岡田 直子 日本薬科大学, 薬学部, 助教 (50636165)
中山 亮子 鶴見大学, 歯学部, 助教 (50749843)
斎藤 一郎 鶴見大学, 歯学部, 教授 (60147634)
山崎 智恵 鶴見大学, 歯学部, 学部助手 (80817122)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | EBウイルス / フードファクター / 疲労 |
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| 研究実績の概要 |
EBウイルス（EBV)の再活性化は様々な疾患の発症への関与が推測されている。EBVは再活性化のシグナルを受けて、最初にEBV前初期遺伝子のBZLF1が活性化してZEBRAタンパクが合成される。ZEBRAは転写因子としても働き、自己及び他のEBV前初期、初期、後期遺伝子の発現を活性化し、潜伏感染状態を脱することができる。このようにBZLF１の転写活性化がEBウイルスの再活性化を単独で誘導することが出来る事から、BZLF1遺伝子の転写活性を測定することで、EBウイルス再活性化の有無を確認することができる。BZLF-1のプロモーターにルシフェラーゼを連結させた遺伝子を組み込んだマウスを使用して、運動負荷、拘束ストレスの環境下でのマウスの各臓器におけるルシフェラーゼ活性を測定した。可逆的な疲労モデルマウスの作出には、運動装置を使用した。BZLF-1－ルシフェラーゼ遺伝子改変マウスを運動装置に入れ、運動負荷をかけ、その後、マウスの各臓器を摘出し、タンパク質を抽出したのち、ルシフェラーゼ活性を測定した。また、拘束ストレスは当該マウスを１日５時間５日間５０ｍLのチューブ内で拘束した後、同様に各臓器を摘出後ルシフェラーゼ活性を測定して評価した。その結果、運動負荷では各臓器のルシフェラーゼ活性は低下する傾向がみとめられた。拘束ストレスマウスでは、コントロール群、拘束群ともにスコアが低く、評価が困難であった。
in vitroの研究では唾液腺上皮細胞にBZLF-1-Luciferaseプラスミドを遺伝子導入し、TPA,n-butylで活性を誘導し、その活性へのフードファクター（レスベラトロール、イソフラボン）の影響について検討を行った。その結果、レスベラトロールはTPA,n-butylによるBZLF-1活性化を抑制した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
マウスのストレス閉所拘束、運動負荷についての検討を進め、in vitroの検討でフードファクターによるBZLF-1の活性化の抑制についての検討を進められた。
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| 今後の研究の推進方策 |
BZLF-1-Luciferase遺伝子導入マウスは２系統（17l、47L）作出したが、17lでは各臓器での活性が低く、ストレスによる活性増減を確認するのは困難なケースがあったため、今後は47Lを用いて検討を進めていく。
また、in vitroの系ではこれまで、レスベラトロールによるBZLF1活性抑制は認められたことから、今後は他のフードファクターについても検討を重ねていく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
業務多忙の為、情報収集の為の学会参加が叶わなかった。
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