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減数分裂は酵母からヒトまで広く保存された現象であり、遺伝情報を次世代へ継承するための特殊な分裂様式である。本研究は、分裂酵母Pef1とTORC1による減数分裂の開始・進行制御機構の解明を目的とした。本年度はPef1の下流シグナル伝達経路について重点的に解析し、減数分裂の開始誘導直後においてPef1がDNA複製および、Cdc2 Tyr-15のリン酸化を促進することを見出した。加えて、pef1欠損株ではcdc10やcdc18、cdc22などDNAの複製に関わる遺伝子群の発現が顕著に抑制されており、Pef1の下流シグナル伝達経路を明らかにするうえで重要な手掛かりを得ることができた。また、Pef1の活性調節因子候補である3つのサイクリン (Clg1、Pas1、Psl1)の遺伝子破壊株においても減数分裂前のDNA複製開始時期に遅延が生じた。特に、clg1欠損株はpef1欠損株と同様にcdc10、cdc18、cdc22の発現および、Cdc2 Tyr-15のリン酸化が抑制された。このことから、減数分裂期においてはclg1がpef1の主な活性調節因子として機能することが予想される。さらに、Pef1の基質を同定するためにリン酸タンパク質の相対定量プロテオミクス解析を実施し、Pef1基質候補を複数個見出すことができた。今後、同プロテオミクス解析データを基にPef1の基質を同定し、減数分裂期におけるPef1 / TORC1間のシグナル伝達経路の解明および同シグナル伝達経路による減数分裂制御機構の解明を目指したい。
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