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イヌ変性性脊髄症の原因の一つと考えられている、神経細胞内におけるイヌ変異型SOD1蛋白凝集体の蓄積を抑制し、神経炎症を制御するため、マクロファージ遊走阻止因子と同様のシャペロン機能を有する熱ショック蛋白 (HSP) に着目した。
HSPの発現を亢進させることで、イヌ変異型SOD1蛋白凝集体の形成が抑制されると仮説し、それを証明するためにHSP発現を亢進させる試薬としてアリモクロモルおよびゲラニルゲラニルアセトンを用いた。
ヒト胎児腎293A細胞にイヌSOD1遺伝子をコードしたプラスミドを導入し、イヌ変性性脊髄症の細胞モデルを作製した。その後、作製した細胞モデルに対してアリモクロモルを添加し、免疫細胞化学を実施した。アリモクロモル添加群と未処理群で比較したところ、アリモクロモルを添加した細胞では凝集体形成が抑制される可能性が示された。アリモクロモルの添加により凝集体形成が抑制されたのは、HSPのシャペロン機能により変異型SOD1タンパクがリフォールディングを受けたことが要因ではないかと考えた。変異型SOD1蛋白がリフォールディングを受けた場合、変異型SOD1タンパクの不溶性が小さくなると考えられる。HSPの凝集体形成抑制効果はHSPのシャペロン機能によるものであることを確認するため、ウエスタンブロッティングを実施した。アリモクロモル添加群と未処理群で不溶性SOD1タンパク量を測定したところ、有意な差を認めなかった。また、HSP発現を亢進するゲラニルゲラニルアセトンを添加したイヌ変性性脊髄症の細胞モデルにおいても、不溶性SOD1タンパク量に関して有意な差を認めなかった。
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