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2019 年度 実施状況報告書

子宮内免疫反応制御による牛性選別精液人工授精方法の確立とその制御機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 19K16010
研究機関福岡県農林業総合試験場

研究代表者

山口 昇一郎  福岡県農林業総合試験場, 畜産部, 研究員 (30502520)

研究期間 (年度) 2019-04-01 – 2022-03-31
キーワード性選別精液 / 牛 / 人工授精 / カフェイン / レスベラトロール / 子宮内白血球
研究実績の概要

近年、乳牛後継牛が減少しており、効率的に雌子牛を生産できる牛性選別精液の活用が推進されている。しかし、封入されている精子数が少なく(通常精液に比べ1割程度)、選別操作により精子がダメージを受けている等により経産牛での受胎率が低いことが酪農現場での大きな課題となっている。
人工授精(AI)により注入された精子は、子宮内で異物と認識され、子宮内の白血球により多くが貪食される。本研究では、申請者らが豚および乳牛で明らかにしたカフェインによる子宮内免疫反応の制御技術による子宮内での精子生存性の向上に加えて、Sirtuin(SIRT)1を活性化し、ミトコンドリアの酸化ストレスを低減するレスベラトロールの添加により、性選別精子運動性の長期化を図る。このことによって通常精液と同等の受胎率が得られるAI方法を確立することが目的である。さらに子宮内免疫反応制御機構や着床等に関する遺伝子発現を解明する。
令和元年度は、モデナ液にカフェインを10mM配合した希釈液にレスベラトロールを添加して性選別精液融解後の精子運動性および精子内ATP含量を検討した。
検討の結果、希釈液にレスベラトロールを添加すると培養1時間目および3時間目までは、精子運動性およびATP含量に大きな差は認められなかったが、培養6時間目には精子運動性およびATP含量が高くなった。
以上のことから希釈液にレスベラトロールを添加すると精子のエネルギー物質であるATP含量が維持され、精子運動性が維持されることが示唆された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

令和元年度は、性選別精子の体外培養においてレスベラトロールの影響について検討した。レスベラトロール添加により精子ATP含量の増加による精子運動性の長期化が確認された。また、サイトブラシによる子宮内膜細胞のサンプリングやRNAの抽出などを行っている。
以上のことから本試験はおおむね順調に進展していると考える。

今後の研究の推進方策

令和2年度は、精子や子宮内膜細胞におけるSIRT1の遺伝子発現や子宮内膜における免疫反応等に関する遺伝子発現の検討を行う。また、本手法によって受胎試験を行い、性選別精液の受胎率が向上するかについての検討を行う。

次年度使用額が生じた理由

新型コロナウイルスによる学会やその他出張の延期または中止のため。次年度の物品費として使用予定。

  • 研究成果

    (1件)

すべて 2019

すべて 学会発表 (1件)

  • [学会発表] 牛性選別精液人工授精におけるカフェインの同時注入が人工授精後の子宮内環境および受胎率に及ぼす影響2019

    • 著者名/発表者名
      山口昇一郎、林武司、柴田果歩、上田修二、柿原孝彦
    • 学会等名
      日本繁殖生物学会第112回大会

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公開日: 2021-01-27  

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