研究課題
細胞のゲノムDNAは、さまざまな内的・外的要因により絶えず損傷を受けている。最も危険なDNA損傷である二本鎖DNA切断は、ヒト細胞では非相同末端連結（NHEJ）または相同組換えによって効率良く修復されるが、これら2つの修復機構とは異なるマイナーな経路も存在する。こうしたマイナーな組換え修復として代替的末端連結（alt-EJ）と一本鎖アニーリング（SSA）が存在しているが、その意義や分子機構の詳細は不明である。本研究では、ヒト培養細胞を用いてalt-EJの必須因子であるPolQに関する機能解析を行うとともに、Alu配列の間で起こる組換えに関する遺伝学的解析を行った。具体的には以下の解析を行った。1. PolQにユニークなドメインの生理的意義の解明PolQは、N末端側にATPaseドメイン、中央部にRad51結合ドメインを有する。また、C末端側に存在するポリメラーゼドメインには他のAファミリーDNAポリメラーゼにはみられない挿入配列が3ヶ所ある。本研究では、これらユニークな領域のalt-EJにおける重要性を明らかにした。さらに、各種アッセイ系で得られた組換え体について、連結部位のシークエンス解析を行い、MMEJ型（短い相同性を利用した連結）であるか非MMEJ型(挿入を伴う連結)であるかを網羅的に解析し、各反応における機能ドメインの役割を調べた。2. Alu-Alu組換えのメカニズムの解明SSAに必須と考えられているRad52や、ミスマッチ修復の主要因子であるMsh2などのDNA修復因子について、Alu組換えの関与の有無と重要性を明らかにした。また、Aluサブファミリーの種類やAlu同士の相同性が組換え効率におよぼす影響についても調べた。
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産科と婦人科 分子標的薬を極める-基礎から臨床まで-
巻: Vol. 87 No. 10 ページ: 1138-1144
