ナノポアシークエンサーを用いたRNA合成及び分解の新規解析手法の開発

2020 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 19K16108
• 研究種目: 若手研究
• 配分区分: 基金
• 審査区分: 小区分43060:システムゲノム科学関連
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 関 真秀 東京大学, 大学院新領域創成科学研究科, 特任准教授 (90749326)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: ナノポアシークエンス / トランスクリプトーム

研究成果の概要

本研究では、人工的に導入したRNA修飾塩基を標的にナノポアシークエンスによる検出の可能性を検証し、転写及び転写後制御の多くの方法論簡略化に向けて基盤技術を創出することを目的とした。人工塩基である4sUをCに塩基変換するTUC-SeqとR2C2法を用いたナノポアシークエンスでの高精度のシークエンスを組み合わせることで、新生RNA及び既存のRNAの全長構造を検出する実験手法、データ解析の開発に成功した。さらに、がん特異的なスプライシングアイソフォームの全長構造の同定を行った。がんにおいて、それらのアイソフォームが蓄積する機構を開発した方法に応用した。

自由記述の分野

ゲノム科学

研究成果の学術的意義や社会的意義

細胞の中にあるRNAは、その合成と分解の合計によって総量が決まります。RNAの合成と分解を測定するためのこれまでの多くの方法では、短いRNAの配列を決めるため、どのような全長配列を持ったRNAがどのような合成や分解の制御を受けているのかは十分にわかっていませんでした。今回、合成された、または、元からあるRNAをラベリングして、ナノポアシークエンサーというRNAの全長の配列を解読できるシークエンサーで検出する方法を確立しました。この方法を利用することで、どのような全長配列を持ったRNAがどのような分解や合成制御を受けているのかが明らかにすることに貢献できると考えられます。