| 研究実績の概要 |
オートファジーの生体における重要性は，関連分子を欠損したマウスの解析からも明らかであるが，実際に生体の『いつ，どこで活性化されているのか？』，『そのオートファジーは何を分解して，どのような生命現象に貢献しているのか？』はほとんど未解明のままである．これらの学術的問いの解明には，生体内におけるオートファジー活性の簡便な可視化が必須であるが，現在のところ，in vivoでオートファジー活性を評価できる低分子化合物は存在していない．
申請者は㈱同仁化学研究所との共同研究により，オートファジーを可視化できる低分子化合物として，DAPGreenとDALGreenの2 つのプローブの開発に成功している（FEBS let., 2018）．DALGreenはオートファジーの終着点であるオートリソソームのみを蛍光標識するのに対し，DAPGreenはそれ以前の隔離膜から蛍光標識することが可能である．すなわち，この2つのプローブの差から，オートファジー活性を評価できると予想される．
本研究では，開発した低分子化合物を改良し，簡便にin vivoオートファジー活性を可視化できるプローブの作製を目指す．
本年度の成果は以下の通りである．① ㈱同仁化学研究所との共同研究により，DAPGreenと同様の性質を持つ赤色蛍光低分子化合物DAPRedを開発した．② 既存の緑色蛍光プローブと新規に開発した赤色蛍光プローブの同時使用によってオートファジー活性を評価できることを確認した．③ 開発したプローブがin vivoのオートファジーを検出できることを確認した．④ 以上の結果を学術論文としてまとめ，投稿している．
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