| 研究課題/領域番号 |
19K16513
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
太田 翔 東京大学, 医科学研究所, 助教 (70837541)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | ヒストン / ES細胞 / CRISPRi |
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| 研究実績の概要 |
今年度は昨年度に引き続き、薬剤依存的に標的遺伝子の発現レベルを抑制することのできるシステムの開発を行なった．昨年度は、ヒストン遺伝子のメッセンジャーRNAの代謝に関わるSlbp遺伝子の発現抑制することのできるES細胞を樹立した．その後の検証により、遺伝子発現抑制に関わる外来性のDNAエレメントが継続的な培養によってサイレンシングされることがわかった．そこで、本年度は、異なる方法を使って薬剤依存的に標的遺伝子の発現レベルを抑制することのできるES細胞を樹立した．さらにヒストン遺伝子を薬剤依存的に発現抑制することができるES細胞も樹立した．これらのES細胞においてRNA-seqを用いて遺伝子発現のプロファイリングを行なった．その結果、ヒストン遺伝子の抑制と細胞老化との接点を見出すことができた．現在これらのES細胞を用いて遺伝子改変マウスの作製に取り組んでいる．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
研究計画では樹立したCRISPRi-Slbp ES細胞を用いて、キメラマウスを作製のうえ、胎性線維芽細胞（MEF）を単離し実験に使用する予定であった．上述のように樹立した細胞において外来性のエレメントにおけるサイレンシングが見られたため、新たにES細胞を樹立する必要が生じた．Slbpに加えてヒストン遺伝子の遺伝子発現を直接抑制することのできるES細胞株を樹立することができた点は今後の研究の進展に寄与するものである．
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| 今後の研究の推進方策 |
これまでに樹立したES細胞を用いてキメラマウスを速やかに作製し、計画通り実験を行う．
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| 次年度使用額が生じた理由 |
新型コロナウイルス感染拡大に伴う活動自粛をはじめとする理由による研究計画の遅れを主とした原因によるものである．次年度使用額と翌年度分をあわせて、研究のバックログを含めた研究費ならびに研究発表のための学会参加にかかる旅費として利用する．
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