| 研究課題/領域番号 |
19K16627
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| 研究機関 | 千葉大学 |
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研究代表者 |
坂本 寛和 千葉大学, 大学院医学研究院, 特任助教 (40724349)
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| 研究期間 (年度) |
2021-03-01 – 2025-03-31
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| キーワード | パーキンサス / アピコンプレクサ / アピコプラスト / 非光合成型葉緑体 |
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| 研究実績の概要 |
マラリア原虫やトキソプラズマに代表されるアピコンプレクサ門原虫は、その細胞内に光合成能を喪失した退化的な葉緑体(以降’原虫葉緑体’)を持つ。この原虫葉緑体は、原虫の生存に必須であるが、その普遍的な生理学的意義は完全には理解されてない。本研究は、アピコンプレクサに近縁な貝類寄生原虫パーキン サスがもつ、独自ゲノムすらも喪失した最も退化した葉緑体に着目し、そこに残されているであろう原虫葉緑体の最小限のタンパク質群および代謝経路の解明を目的とした。さらに、パーキンサスの遺伝子導入法の改善、改良を実施し、より効率的にパーキンサスを用いた研究ができるための基盤技術の構築も目指した。 令和3年度にミトコンドリア内へ任意のタンパク質を輸送するための手法を開発し、この手法を用いてパーキンサス葉緑体移行タンパク質へGFPを融合させたタンパク質の安定発現細胞の作出を実施した。遺伝子導入後に、ドット状のGFPシグナルが確認され、これがパーキンサス葉緑体であることが示唆されたが、薬剤選択による安定発現細胞の作出ができず、原虫葉緑体プロテオー ム解析の実施には至っていない。 一方、パーキンサスの新たな遺伝子導入(エレクトロポレーション)方法の開発に成功し、令和4年度に論文として報告した。令和５年度は、本研究課題を基とした国際共同研究強化（A）による約４ヶ月間の海外滞在を実施したため、十分な研究期間を確保するために研究期間を令和６年度まで延長した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
国際共同研究強化（A）による海外滞在を実施し、その間、研究活動が実施できなかったため。
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| 今後の研究の推進方策 |
パーキンサス葉緑体局在GFPを安定発現させた”葉緑体マーカー”パーキンサス細胞、および近位依存性ビオチン化標識法のための安定発現細胞を用いた、イメージング解析とプロテオーム解析の条件検討を実施する計画である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
令和５年度に本研究課題を基とした国際共同研究強化（A）による海外滞在を実施し、その期間に本研究活動が実施できなかったため。令和６年度は、パーキンサス遺伝子組換え実験、イメージング解析およびプロテオーム解析のための費用を支出する。また、共同研究と学会での成果発表のための旅費を支出する予定である。
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