| 研究実績の概要 |
本研究では、精巣胚細胞腫瘍の患者予後規定因子として重要視されているセミノーマから非セミノーマへの腫瘍進展に関わる分子異常の検索を行った。
精巣胚細胞腫瘍にて染色体数的異常の報告がある1, 7, 8, 12, 17, Xの6つの染色体について、セントロメア近傍領域を標的とした蛍光標識DNAプローブを用いたfluorescence in situ hybridizationを施行し、染色体不安定性 (染色体数のばらつき) を最頻値から外れた細胞の割合で評価した。混合性腫瘍内のセミノーマは単一型セミノーマに比して染色体不安定性が有意に高く、両者の分子異常のステータスの違いが確認された。
次に上記2つのタイプのセミノーマそれぞれ6例ずつ計12例について、網羅的遺伝子発現解析を施行した。複数の遺伝子に2群間での発現量の有意差が検出され、階層型クラスター解析で上記の腫瘍タイプに対応した2グループに分別された。その遺伝子群のうち、発現量の差異が顕著であった亜鉛代謝関連分子についてRT-PCR法によるmRNA発現、免疫組織化学染色による蛋白発現の確認を行った。
また非セミノーマの腫瘍進展に関わる他の分子異常として、精巣原発絨毛癌におけるepidermal growth factor receptorの蛋白異常発現と遺伝子増幅が、検討した12例のほぼ全例でみられるも、治療効果予測因子であるチロシンキナーゼ領域のエクソン全長（エクソン18-24）の遺伝子変異はいずれの症例にも検出されなかった。
本研究により、セミノーマから非セミノーマへの腫瘍進展と関与する分子機構の一部が明らかになったが、当初計画していた前浸潤病変としてのgerm cell neoplasia in situに対する検討や、DNAメチル化アレイ解析までには至らず、本研究課題で見出された分子の機能解析とともに検証を進めたい。
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