がんドライバーMYCの新規結合パートナーの同定とその機能的意義の検討

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 19K16791
• 研究機関: 国立研究開発法人国立がん研究センター
• 研究代表者: 宮本 亮 国立研究開発法人国立がん研究センター, 研究所, 外来研究員 (40770863)
• 研究期間 (年度): 2019-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: MYC / 白血病 / 免疫沈降

研究実績の概要

MYCは多くのがん種で悪性化に寄与しており、その機能発現機序の解明と新規治療戦略の創出が求められている。我々はクロマチン上に局在するタンパク質を標的とした独自の免疫沈降法から新規の結合パートナーを特定した。本研究ではMYCと結合パートナーとの詳細な結合様式やMYCの機能発現におけるこの結合の意義を検討した。最終年度は生化学実験および初代マウス造血前駆細胞を用いた細胞生物学的実験を主として実施した。免疫沈降法では他のMYCパラログも同定したタンパク質と結合能をもつことや、この結合がDNAを介した間接的なものではなく直接的なものであることを認めた。アミノ酸レベルでの特定には至らなかったが、多種類のMYC欠損変異体を用いた検討からMYCは複数の部位で当該タンパク質と結合することを明らかにした。初代造血前駆細胞を用いた細胞レベルの検討では、MYCの細胞不死化能が結合パートナーの共発現により増強される一方で、結合パートナーのノックダウンにより減弱することがわかり、この結合の機能的重要性が示された。同様に一部のヒト白血病細胞株でも結合パートナーのノックダウンに対して感受性があることがわかった。今後これらの細胞株を用いた検討も有用と考えられる。

研究成果

• [雑誌論文] Protocol for fractionation-assisted native ChIP (fanChIP) to capture protein-protein/DNA interactions on chromatin (2021)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto R, Yokoyama A
  • 雑誌名: STAR Protocols 巻: 2 ページ: 100404
  • DOI: 10.1016/j.xpro.2021.100404
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Activation of CpG-rich promoters mediated by MLL drives MOZ-rearranged leukemia (2020)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto R, Okuda H, Kanai A, Takahashi S, Kawamura T, Matsui H, Kitamura T, Kitabayashi I, Inaba T, Yokoyama A
  • 雑誌名: Cell Reports 巻: 32 ページ: 108200
  • DOI: 10.1016/j.celrep.2020.108200
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] HOXA9 promotes MYC-mediated leukemogenesis by maintaining gene expression for multiple anti-apoptotic pathways (2020)
  • 著者名/発表者名: Miyamoto R、Kanai A、Okuda H、Takahashi S、Matsui H、Inaba T、Yokoyama A
  • 雑誌名: bioRxiv 巻: . ページ: .
  • DOI: 10.1101/2020.10.20.347765
  • オープンアクセス
• [備考] 国立がん研究センター・鶴岡連携研究拠点ホームページ
  • URL: https://www.tml.ncc.go.jp