| 研究実績の概要 |
本研究は、がん細胞を標的とした抗原特異的T細胞療法において問題となる「抗原発現の不均一性」を解消するために必要となる、多様な膵臓がん細胞に対して持続感染可能な腫瘍溶解性ウイルスベクターの開発を最終目的としている。
昨年度は、多様な膵臓がん細胞株に共通する感染制御機構を見出すために、複数の膵臓がん細胞株をAmerican Type Culture Collection (ATCC)より追加導入して実験に使用した。本研究にて使用する腫瘍溶解性ウイルスである麻疹ウイルスは、細胞接着分子であるNectin-4を介してがん細胞に感染することが報告されている。そのため、これまでに導入した膵臓がん細胞株9株のNectin-4発現をフローサイトメトリーにより解析した。その結果、Nectin-4陽性株は4株(Capan-2, KLM-1, PK-1, PK-8)、陰性株は5株(AsPC-1, BxPC-3, MIA PaCa2, PANC-1, PK-59)であることが確認できた。
次に、麻疹ウイルス感染実験の際にNectin-4発現量の差がその後の解析に影響する事を防ぐため、Nectin-4強制発現株の樹立を実施した。レトロウイルスベクターを用いて上述した9株にNectin-4遺伝子を導入し、同等の発現量を有する細胞をフローサイトメーターによりソーティングすることにより、上記の目標を達成した。
また、本研究にて開発を目指している麻疹ウイルスベクターは、T細胞との併用療法に用いる計画であるため、T細胞を含む免疫細胞への感染能を欠失させる必要がある。しかし、このウイルスは麻疹ウイルスを増幅するために従来から用いられてきたVero/SLAM細胞では増幅できない。そこで、このウイルスを増幅可能なVero/Nectin-4細胞株を樹立した。
以上が昨年度の研究成果である。
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