| 研究課題/領域番号 |
19K17338
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| 研究機関 | 京都府立医科大学 |
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研究代表者 |
森元 英周 京都府立医科大学, 医学(系)研究科(研究院), 助教 (20827539)
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| 研究期間 (年度) |
2019-04-01 – 2022-03-31
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| キーワード | Angiotensin1-7 / 褐色脂肪細胞 / 直接活性化 |
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| 研究実績の概要 |
in vivoの実験に先立ち、不死化処理を施した前駆褐色脂肪細胞株であるCB1細胞を用いたin vitroの実験を行った。CB1細胞に対する分化誘導開始日をday0とし、day0からAngiotensin1-7(Ang1-7)と比較対象としてCL316243(選択的β3アドレナリンレセプターアゴニスト)を投与し無投与をコントロールとしてday4と8に蛋白を抽出し、Western blotで蛋白発現の変化について検証した。、褐色脂肪細胞(BAT)の熱産生に関わる蛋白であるUCP1はAng1-7投与群で発現が増加した。一方、脂肪滴の成熟マーカーとして用いられるperilipinは、day4ではAng1-7高濃度群で有意に発現が増加するも、day8では逆にAng1-7投与群で発現が減少したが、脂肪分解によりperilipinが分解されたことが示唆された。p38-MAPKは、PGC-1αの発現を増加させかつ活性化させることでUCP1の発現を増加させ、褐色脂肪細胞を活性化させることが知られているが、Ang1-7投与によりp38-MAPKのリン酸化が増加した。また、AMPKのリン酸化はANg1-7投与により増加した。活性化した褐色脂肪細胞では、ミトコンドリアにおけるATP合成がUCP1を介した熱エネルギー産生に傾くため、ATP合成の需要に見合うだけのATPが合成されない。その結果、AMPが増加し、AMPKのリン酸化が増加したと考えられた。以上より、Ang1-7にはMas receptorを介して褐色脂肪細胞を直接活性化する作用が存在することが明らかになった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当初予定していたC57BL/6Jマウスを用いた実験に先立ち、培養細胞を用いた実験を行ったが、その実験で予想していた以上に興味深く有意義な結果が得られ結果が得られたため、in vitroでの実験が長くなった。しかし、この先行研究によりin vivoの実験において注目する経路が絞られてきており、まだ動物実験は開始できていないが、全体としてやや遅れていると判断した。
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| 今後の研究の推進方策 |
昨年度に続き、in vitroの実験にて非常に有意義なで得られたので、その情報をもとにターゲットを絞ることで、今後は進捗状況は改善してくると考えられる。
今後は、培養細胞を用いた実験を更に進めるとともに、マウスを用いたin vivoの実験系も開始していく。その実験系においては、薬剤投与のタイミングなども考慮しながら研究を進めていく。培養細胞で得られた結果からは褐色脂肪細胞に対してAngiotensin1-7が効果を発揮する時期は、細胞増殖が活発な比較的若い時期であることが推察されるため、計画にあるマウスだけでなく、比較的高齢で細胞増殖が活発でないマウスに対するAngiotensin1-7の効果との比較も行いながら課題の究明を進めていく。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
差引額が僅少なため物品購入等にも使用できなかったため。翌年度分と合算し物品費として使用していく。
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